（l）為構(gòu)建重組質(zhì)粒，研究小組從數(shù)據(jù)庫(kù)查找到VNNl的DNA序列，并設(shè)計(jì)引物。上游引物：5-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3下劃線為HindⅢ酶切位點(diǎn)），下游引物：5-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3（下劃線為BamHI酶切位點(diǎn)），之后進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR的原理是________。擴(kuò)增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接，需用________（填具體酶）切割VNNI基因和含GFP基因的載體，再用________酶處理，構(gòu)建重組質(zhì)粒。

（2）GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為________________，其作用是________。用之前相同的限制酶對(duì)GFP - VNNI重組質(zhì)粒切割后，進(jìn)行電泳鑒定時(shí)得到如圖1所示的部分條帶，結(jié)果表明________。

（3）IL -6為體內(nèi)重要的炎癥因子，能與相應(yīng)的受體結(jié)合，激活炎癥反應(yīng)。圖2為GFP-VNNI重組質(zhì)粒對(duì)細(xì)胞分泌IL -6的影響，由此說(shuō)明________________，同時(shí)發(fā)現(xiàn)與正常組比較，空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達(dá)有輕微升高，造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。

A.圖甲表示猞猁和雪兔之間的關(guān)系

B.圖甲表示小家鼠和褐家鼠之間的關(guān)系

C.圖乙表示豆科植物和根瘤菌之間的關(guān)系

D.圖丙表示雙小核草履蟲(chóng)和大草履蟲(chóng)之間的關(guān)系

（l）配制培養(yǎng)基：加入牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、NaCI、H2O及________等并滅菌；該培養(yǎng)基按功能劃分，屬于_______培養(yǎng)基。

（2）分離希瓦氏菌：將10 g土樣溶于90 mL蒸餾水中，再稀釋成多個(gè)倍數(shù)，取多個(gè)稀釋倍數(shù)的土壤樣品液0．1mL分別接種到多個(gè)平板上，這樣做的目的是____；培養(yǎng)一段時(shí)間后，A、B研究員在105稀釋倍數(shù)下得到的結(jié)果：A涂布4個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是150、178、259、310;B涂布4個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是152、165、175、184，則每克土壤樣品中的希瓦氏菌數(shù)量最可能為________個(gè)。

（3）進(jìn)一步純化希瓦氏菌：采用平板劃線法接種培養(yǎng)一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)第一劃線區(qū)域上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落，第二劃線區(qū)域上幾乎無(wú)菌落，分析出現(xiàn)此現(xiàn)象的原因可能是________（答出兩點(diǎn)）。

（4）研究人員還欲采用測(cè)定ATP含量的方法估算希瓦氏菌數(shù)，該方法的依據(jù)是____________，此方法與顯微鏡直接計(jì)數(shù)相比，得到的希瓦氏菌數(shù)目________（填“多”或“少”），原因是____________。

A.生長(zhǎng)素既能促進(jìn)生長(zhǎng)也能抑制生長(zhǎng)

B.對(duì)于植物的不同器官來(lái)說(shuō)生長(zhǎng)素促進(jìn)生長(zhǎng)的最適濃度不同

C.根對(duì)生長(zhǎng)素濃度最敏感

D.圖中“D”點(diǎn)對(duì)應(yīng)的生長(zhǎng)素濃度對(duì)根、芽、莖都起促進(jìn)生長(zhǎng) 的作用

A.鮑森·詹森的實(shí)驗(yàn)證明，胚芽鞘尖端產(chǎn)生的影響可以透過(guò)瓊脂片傳遞給下部

B.拜爾的實(shí)驗(yàn)證明，胚芽鞘彎曲生長(zhǎng)是因?yàn)榧舛水a(chǎn)生的影響在其下部分布不均勻造成的

C.溫特實(shí)驗(yàn)中如果在切去尖端的胚芽鞘一側(cè)放上沒(méi)有接觸過(guò)胚芽鞘尖端的瓊脂塊，胚芽鞘能夠生長(zhǎng)但不彎曲

D.溫特的實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明胚芽鞘的彎曲生長(zhǎng)確實(shí)是一種化學(xué)物質(zhì)引起的

回答下列問(wèn)題：

（l）有眼和無(wú)眼中顯性性狀是____，B．b基因位于________（填“�！被颉�X”）染色體上。

（2）親本的基因型為____；讓F2中的棒眼果蠅自由交配，理論上F3中無(wú)眼雄果蠅所占的比例是____。

（3）已知染色體缺失會(huì)導(dǎo)致基因丟失，若同源染色體均不攜帶控制眼形的基因時(shí)，胚胎致死。某實(shí)驗(yàn)小組發(fā)現(xiàn)F2中出現(xiàn)一只圓眼雌果蠅，現(xiàn)要探究該雌果蠅產(chǎn)生的可能原因，請(qǐng)以實(shí)驗(yàn) 中所出現(xiàn)的個(gè)體為材料設(shè)計(jì)最簡(jiǎn)雜交實(shí)驗(yàn)，并得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論。（不考慮環(huán)境因素的影響）

實(shí)驗(yàn)思路：__________________________；

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：________________________。

（1）要從土壤中分離目標(biāo)菌，所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是_________。

（2）在從土壤中分離目標(biāo)菌的過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長(zhǎng)并形成菌落（如圖所示）。如果要得到目標(biāo)菌，應(yīng)該選擇________菌落進(jìn)一步純化，選擇的依據(jù)是________。

（3）土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈�源。若要設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈�源，�?qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論，即_______。

（4）該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌，使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶（酶E）。為了比較酶E與天然酶降解W能力的差異，該小組擬進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)完善相關(guān)內(nèi)容。

①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上，A處滴加含有酶E的緩沖液，B處滴加含有相同濃度天然酶的緩沖液，C處滴加_________，三處滴加量相同。

②一段時(shí)間后，測(cè)量透明圈的直徑。若C處沒(méi)有出現(xiàn)透明圈，說(shuō)明___________；若A、B處形成的透明圈直徑大小相近，說(shuō)明___________。

A. 在AB段限制反應(yīng)速率的主要因素是酶的用量

B. 在BC段限制反應(yīng)速率的因素之一是反應(yīng)物濃度

C. 在AC段增加反應(yīng)物濃度,可以明顯加快反應(yīng)速率

D. 在該實(shí)驗(yàn)給定條件下,果膠酶的最佳用量是B點(diǎn)對(duì)應(yīng)的值

A. ①步驟使用的培養(yǎng)基已經(jīng)滅菌

B. ①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行

C. ③到④的過(guò)程中，每次接種前后都需要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行灼燒處理

D. 圖中操作結(jié)束后需在培養(yǎng)基皿蓋上標(biāo)注菌種及接種日期等信息

（l）圖中五種成分構(gòu)成___________；分析圖示可知，圖中沒(méi)有標(biāo)出的生態(tài)系統(tǒng)的組成成分是________。

（2）該生態(tài)系統(tǒng)中碳元素以_____形式在A～D之間流動(dòng)；圖示可以發(fā)生還原氫與氧氣結(jié)合的過(guò)程是______（填圖中序號(hào)）。

（3）根據(jù)圖中營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)，若要使D同化的能量增加100kJ，則至少需要第一營(yíng)養(yǎng)級(jí)提供的能量為________kJ；B用于生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖的能量流動(dòng)去向是________。

（4）亞馬遜河流域的森林持續(xù)發(fā)生大火，給當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重的影響，這說(shuō)明生物多樣性具有______價(jià)值。運(yùn)用恢復(fù)生態(tài)學(xué)重建了該森林曾有的植物和動(dòng)物群落，該過(guò)程屬于群落的______演替。