DNA復制過程中,保證復制準確無誤進行的關鍵步驟是 ( )
A.破壞氫鍵并使DNA雙鏈分開 |
B.游離核苷酸與母鏈堿基互補配對 |
C.配對的游離核苷酸連接成子鏈 |
D.子鏈與模板母鏈盤繞成雙螺旋結構 |
科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
圓褐固氮菌是自生固氮菌,為經濟有效地提高農作物產量,人們一直在努力研究、尋找固氮基因。對基因的研究常常因研究樣品中DNA含量太低而難以進行,PCR技術有效地解決了這個問題。如今對基因的深入研究使人類跨入了蛋白組研究時代,從復雜的細胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質是該研究要做的基本工作之一。
(1)某同學在做微生物實驗時,不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起,已知青霉素會影響固氮菌的生長繁殖,但不影響真菌的生長繁殖。請?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實驗步驟:
①分別配置 的培養(yǎng)基和 的培養(yǎng)基,分別分成兩份,依次標上A、a、B、b備用;
②分別向A、B培養(yǎng)基接種 ;
③把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d—4d;
④從A、B培養(yǎng)基上生長的 中挑取生長良好的菌株,分別接種到 中;
⑤ 。
(2)用基因工程技術從經過分離、提純的圓褐固氮菌中獲取固氮基因,然后進行PCR擴增。下列表1和表2分別表示用PCR擴增固氮基因的反應體系及反應條件。
PCR反應體系 | 50ul |
緩沖液 | 5ul |
脫氧核苷酸 | 1ul |
引物A | 0.5ul |
引物B | 0.5ul |
DNA聚合酶 | 0.5U |
模板DNA | 1-2ul |
加去離子水補足至50 ul |
反應條件 | ||
溫度 | 時間 | |
變 性 | 95℃ | 30s |
復 性 | 55℃ | 30s |
延 伸 | 72℃ | 1min |
30個循環(huán)后 | 適宜 | 5-10min |
保 溫 | 4℃ | 2h |
①從上表中可得出,PCR技術與DNA復制相比較,主要區(qū)別之一是 。
此外,從反應條件看,所使用的DNA聚合酶應具有__________的特點。每次循環(huán)都需要2種引物的主要原因是_______________ ________________。
②下圖為第1輪循環(huán)產生的產物。請繪出以a鏈和b鏈為模板經PCR擴增的產物。
(3)在對固氮基因產物的生產研究中,需要從復雜的細胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質。下圖表示蛋白質提取和分離實驗涉及的相關原理。
①圖甲表示相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠色譜法分離的過程。試管中收集到的液體最先出現(xiàn)的是相對分子質量較大的蛋白質,原因是 。
②圖乙所示實驗模擬電泳現(xiàn)象,U型管左側的顏色逐漸變深,原因是 。
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