【題目】菊天牛是菊花的主要害蟲之一。科研人員將抗蟲基因轉(zhuǎn)入菊花,培育出抗蟲菊花。下圖是獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:

(注:卡那霉素抗性基因KanR為標(biāo)記基因,菊花葉片對(duì)卡那霉素高度敏感)

(1)質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,其化學(xué)本質(zhì)是___________

(2)限制酶M和N切割后產(chǎn)生的相同黏性末端是_________,連接它們所需要的基本工具是_________

(3)為了促進(jìn)對(duì)重組質(zhì)粒的吸收,可用________處理土壤農(nóng)桿菌;使其處于感受態(tài)。

(4)將愈傷組織轉(zhuǎn)移到添加一定濃度植物激素、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及_______的固體培養(yǎng)基中,在適宜條件下進(jìn)行培養(yǎng),篩選轉(zhuǎn)基因菊花。

(5)用PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時(shí),需根據(jù)抗蟲基因(目的基因)兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)特異引物,若其中一種引物共用了31個(gè),則目的基因最多擴(kuò)增了_______次。

(6)將轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料以適當(dāng)比例混合后飼喂菊天牛2齡幼蟲,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。請(qǐng)據(jù)表回答:

組別

處理

菊天牛死亡率(%)

實(shí)驗(yàn)組

飼喂轉(zhuǎn)基因菊花植株的嫩莖及葉片與人工飼料混合物

53.33

對(duì)照組

13.33

①對(duì)照組應(yīng)飼喂_____________與人工飼料混合物。

②實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示_____________差異顯著,說明轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的毒殺作用。

【答案】 環(huán)狀DNA GATC DNA連接酶 氯化鈣溶液(Ca2+) 卡那霉素 5 等量非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片 實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組菊天牛死亡率

【解析】試題分析題圖,圖示為獲得轉(zhuǎn)基因菊花的技術(shù)流程圖,先是目的基因(抗蟲基因)和質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá);接著采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞;再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將受體細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株。分析表格:實(shí)驗(yàn)組的死亡率明顯高于對(duì)照組

(1)質(zhì)粒是小型環(huán)狀DNA分子,是基因工程采用的運(yùn)載體。

(2)根據(jù)圖示限制酶MN的識(shí)別序列可知,它們切割產(chǎn)生的黏性末端都是GATC(CTAG);DNA連接酶能將具有相同黏性末端的DNA片段連接形成重組DNA。

(3)將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞(農(nóng)桿菌時(shí),常采用感受態(tài)細(xì)胞法,即用Ca2+(或CaCl2)處理農(nóng)桿菌細(xì)胞,使其處于易于吸收周圍環(huán)境中的感受態(tài)。

(4)由圖可知,標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因,因此可用含有卡那霉素的培養(yǎng)基來篩選轉(zhuǎn)基因菊花

(5)用PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花是否含有目的基因時(shí),需根據(jù)抗蟲基因(目的基因)兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)特異引物,假設(shè)目的基因擴(kuò)增了n次,則需要引物的對(duì)數(shù)為2n-1,已知其中一種引物共用了31個(gè),則2n-1=31,n=5。

(6)①實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要遵循對(duì)照原則和單一變量原則,本實(shí)驗(yàn)的目的是探究轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲的作用,可見自變量為是否加入轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片,因此對(duì)照組應(yīng)飼喂等量的非轉(zhuǎn)基因菊花嫩莖及葉片與人工飼料混合物。

②據(jù)表分析,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組菊天牛死亡率差異顯著,說明轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)菊天牛2齡幼蟲有較強(qiáng)的毒殺作用。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下列有關(guān)物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞方式的分析,不正確的是( )

A. 低溫對(duì)物質(zhì)跨膜運(yùn)輸?shù)乃俾屎退\(yùn)輸物質(zhì)種類都有很大影響

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