Question

1．Ⅰ胡蘿卜素是一種常用的食用色素，可分別從胡蘿卜或產(chǎn)胡蘿卜素的微生物菌體中提取．流程圖為某同學(xué)利用酵母菌R獲得胡蘿卜素的部分流程．
酵母菌R的篩選→酵母菌R的培養(yǎng)→菌體裂解→離心沉淀→萃取→萃取物→胡蘿卜素的鑒定
請回答下列問題：

（1）平板劃線法能將聚集的菌種逐步稀釋分散（或分散）到培養(yǎng)基的表面，從而可以分離到由一個細(xì)胞繁殖而來的菌落．平板劃線法一般不用于活菌計數(shù)的原因是得到的菌落多數(shù)不是單一菌落，菌落數(shù)遠(yuǎn)小于活菌數(shù)．
（2）為了探究萃取物是否是胡蘿卜素，該同學(xué)將葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、萃取物和色素混合液（含4種光合色素）依次點樣在濾紙的1、2、3、4、5位置（如圖1所示），并進(jìn)行層析，濾紙條上各色素帶的位置為B（填字母）時，即可說明該萃取物最可能是胡蘿卜素．
（3）酵母菌R能分泌A、B兩種酶，下如圖2是某課題組關(guān)于這兩種酶的實驗結(jié)果：
①圖中結(jié)果顯示，在40℃至60℃范圍內(nèi)，熱穩(wěn)定性較好的酶是A酶．高溫條件下酶容易失活，其原因是高溫使酶的空間結(jié)構(gòu)破壞．
②由圖可知，若要從酵母菌R種群中篩選出能產(chǎn)生熱穩(wěn)定性高的酶的菌株，應(yīng)在大于或等于80℃的條件下培養(yǎng)．
③對A、B兩種酶進(jìn)行分離提純，若分子量相差較大，最好采用凝膠色譜法方法．

Answer 1

分析 1、葉綠素中各色素的分離原理是它們隨層析液在濾紙上擴散速度不同，從而分離色素．溶解度大，擴散速度快；溶解度小，擴散速度慢．濾紙條從上到下依次是：胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b．
2、據(jù)圖2分析，自變量為溫度和酶的種類（A酶及B酶），因變量為酶活性，在40℃至60℃范圍內(nèi)，A酶活性的變化較B酶小，說明在在40℃至60℃范圍內(nèi)，A酶的熱穩(wěn)定性較好．

解答 解：（1）平板劃線法能將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，從而可以分離到由一個細(xì)胞繁殖而來的菌落．平板劃線法得到的菌落多數(shù)不是單一菌落，菌落數(shù)遠(yuǎn)小于活菌數(shù)．所以一般不用于活菌計數(shù)．
（2）葉綠體中的色素，由于溶解度不同，在濾紙條上的擴散速率不同，擴散最快的是胡蘿卜素，其次分別是葉黃素、葉綠素a、葉綠素b，所以試驗結(jié)果，若4位置在最上，則說明其為胡蘿卜素，其次為3位置上的葉黃素，接著2位置上的葉綠素a，在濾紙條最下面是位置1上的葉綠素b．即濾紙條上各色素帶的位置為B時，即可說明該萃取物最可能是胡蘿卜素．
（3）①據(jù)圖2分析，自變量為溫度和酶的種類（A酶及B酶），因變量為酶活性，在40℃至60℃范圍內(nèi)，A酶活性的變化較B酶小，說明在在40℃至60℃范圍內(nèi)，A酶的熱穩(wěn)定性較好；高溫會使酶的空間結(jié)構(gòu)破壞，從而使酶容易失活．
②據(jù)圖2分析，A和B兩種酶在溫度為80℃時其中的B酶會失活，因此若要從酵母菌R種群中篩選出能產(chǎn)生熱穩(wěn)定性高的酶的菌株，應(yīng)在大于或等于80℃的條件下培養(yǎng)．
③A、B兩種酶是由酵母菌分泌，其本質(zhì)都是蛋白質(zhì)，對其進(jìn)行分離提純，若分子量相差較大，可采用凝膠色譜法．
故答案為：
（1）稀釋分散（或分散）    得到的菌落多數(shù)不是單一菌落，菌落數(shù)遠(yuǎn)小于活菌數(shù)
（2）B         
（3）①A酶    高溫使酶的空間結(jié)構(gòu)破壞    
②大于或等于80℃
③凝膠色譜法

點評 本題主要考查微生物的培養(yǎng)和胡蘿卜素的鑒定，意在強化學(xué)生對相關(guān)實驗操作的識記與理解．