Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達．抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段．
（1）選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點，是因為H蛋白在成年個體的正常組織中（填“低表達”或“高表達”）．H蛋白是一個跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如圖所示．制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應(yīng)構(gòu)建區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細胞表達并提純．
（2）將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，從該小鼠的獲取B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合，使用的不同于植物體細胞雜交的誘導方法是 ．
（3）將融合細胞在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細胞生長．將雜交瘤細胞轉(zhuǎn)到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，進行抗體陽性檢測．經(jīng)多次篩選，就能得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細胞，該細胞的特點是 ．
（4）將篩選得到的雜交瘤細胞，經(jīng)過或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，獲取大量的單克隆抗體．
（5）治療乳腺癌時，可單獨使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導彈”，殺死癌細胞．這充分體現(xiàn)了單克隆抗體的特點．

Answer 1

【答案】
（1）低表達；胞外
（2）脾臟；滅活的病毒
（3）選擇性；既能在體外大量增殖,又能產(chǎn)生抗H蛋白的抗體
（4）體外（培養(yǎng)）
（5）特異性強（或“識別抗原部位專一”）
【解析】解：（1）根據(jù)題意可知，H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達，因此原癌基因的表達產(chǎn)物H蛋白在正常組織中低表達；由于抗體主要存在于細胞外液中，因此根據(jù)H蛋白的結(jié)構(gòu)圖可知，若用H蛋白制備抗原需要利用胞外區(qū)基因，由制備獲得的抗體作用于該抗原的胞外區(qū)． （2）將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)，從該小鼠的脾臟中獲取B淋巴細胞與骨髓瘤細胞進行融合；誘導植物原生質(zhì)體融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）、化學法（聚乙二醇），誘導動物細胞融合的方法有物理法、化學法和生物法（滅活的病毒），因此使用的不同于植物體細胞雜交的誘導方法是用滅活的病毒誘導． （3）將融合細胞接種在選擇培養(yǎng)基中，從中選出雜交瘤細胞；再采用抗體陽性檢測法篩選出雜交瘤細胞，該細胞的特點是既能在體外大量增殖，又能產(chǎn)生抗H蛋白的抗體．（4）將雜交瘤細胞經(jīng)過體外培養(yǎng)或小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，獲得大量的單克隆抗體．（5）單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強，靈敏度高．

所以答案是：（1）低表達　胞外 （2）脾臟　滅活的病毒（3）選擇性　既能在體外大量增殖，又能產(chǎn)生抗H蛋白的抗體 （4）體外（培養(yǎng)）（5）特異性強（或“識別抗原部位專一”）

【考點精析】解答此題的關(guān)鍵在于理解單克隆抗體的制備的相關(guān)知識，掌握對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細胞；同時用動物細胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細胞并提��；促使它們細胞融合；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細胞；然后對它進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；最后將雜交瘤細胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體．