Question

【題目】動物細胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能�，F(xiàn)在己經(jīng)廣泛應(yīng)用于多種學科的研究：新發(fā)展起來的雜交瘤技術(shù)，為制備單克隆抗體開辟了新途徑。研究表明DNA合成有兩條途徑：“S途徑”和“D途徑”，淋巴細胞(漿細胞)有“S途徑”和“D途徑”；骨髓瘤細胞只有“D途徑”；HAT培養(yǎng)液中氨基喋呤可以阻斷DNA合成的“D途徑”。下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。回答下列問題：

⑴___________技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。

⑵單克隆細胞是指__________________________________________________。

⑶單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是____________。

⑷雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞的_____________特點，又具備淋巴細胞的__________特點。

⑸圖示過程，有兩次的篩選。第一次是用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細胞，那么淋巴細胞(漿細胞)在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是_________，骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是_______。

Answer 1

【答案】（1）細胞培養(yǎng)技術(shù)、細胞融合技術(shù) （2）單個細胞增殖，形成的細胞群

（3）特異性強，靈敏度高 （4）在體外大量增殖（無限增殖） 分泌特異性抗體

（5）缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力 其DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進行DNA復制

【解析】（1）細胞培養(yǎng)技術(shù)、細胞融合技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。

（2）單克隆細胞是指單個細胞增殖，形成的細胞群。

（3）單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強，靈敏度高，可大量制備。

（4）雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞的在體外大量增殖（無限增殖）的特點，又具備淋巴細胞能分泌特異性抗體的特點。

（5）圖示過程中有兩次的篩選，第一次是用HAT培養(yǎng)液篩選出雜交瘤細胞，那么淋巴細胞（效應(yīng)B細胞）在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是缺乏在體外培養(yǎng)液中增殖的能力；骨髓瘤細胞在HAT培養(yǎng)液中不生長的原因是其DNA合成途徑被氨基喋呤阻斷而不能進行DNA復制。

項目	第一次篩選	第二次篩選
篩選原因	誘導融合后得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞	由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細胞
篩選方法	用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞（“BB”細胞、“瘤瘤”細胞）都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞（“B瘤”細胞）才能生長	用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群
篩選目的	得到雜交瘤細胞	得到能分泌所需抗體的雜交瘤細胞