Question

【題目】（1）逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染法是目前將目的基因?qū)�人�?xì)胞的最有效的方法。山中伸彌于2006年把c-Myc等4個(gè)關(guān)鍵基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠的皮膚成纖維細(xì)胞，誘導(dǎo)其變成多能干細(xì)胞——iPS細(xì)胞。在該技術(shù)中，逆轉(zhuǎn)錄病毒作為___________（基因工程的工具），它利用外殼蛋白與受體細(xì)胞表面的___________相互識(shí)別而感染皮膚成纖維細(xì)胞。若想提高轉(zhuǎn)化效率，可利用___________技術(shù)改造病毒外殼蛋白。

（2）脂質(zhì)體介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移的效率很高，是植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)中常用的方法之一。脂質(zhì)體是一種用卵磷脂等物 質(zhì)制備的中空膜泡狀結(jié)構(gòu)的人工膜。傳統(tǒng)的脂質(zhì)體是將磷脂、膽固醇或其他脂類(lèi)的乙醚溶液加入到DNA溶液中，經(jīng)特殊處理得到單層或雙層的帶DNA的脂質(zhì)體小泡，被受體細(xì)胞內(nèi)吞而實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移。

①脂質(zhì)體能介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移的原理是細(xì)胞膜具有一定的________，轉(zhuǎn)移前植物受體細(xì)胞首先要_________。

②從理論上分析，脂質(zhì)體對(duì)受體細(xì)胞___________（填“有”或“無(wú)”）選擇性。

③若帶有DNA的脂質(zhì)體小泡導(dǎo)入動(dòng)物體，能否使受體產(chǎn)生免疫反應(yīng)？____________________。

（3）實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過(guò)程如圖所示，在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的___________，以防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染；丙過(guò)程中得到的細(xì)胞一般為___________（填“正常”或“不正�！保┖诵�。

Answer 1

【答案】載體 受體蛋白質(zhì)工程流動(dòng)性去除細(xì)胞壁無(wú)不能抗生素正常

【解析】

基因工程是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過(guò)體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類(lèi)型和生物產(chǎn)品。蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需要。細(xì)胞工程能打破物種之間的界限，培育出作物新品種。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。第（3）小題圖中，甲表示獲取實(shí)驗(yàn)小鼠的組織細(xì)胞，乙表示用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)皮膚細(xì)胞，丙表示原代培養(yǎng)，丁表示傳代培養(yǎng)。

（1）基因工程中的目的基因自身不能復(fù)制，需要載體攜帶它們到合適的細(xì)胞中復(fù)制和表現(xiàn)其功能。常用的載體有質(zhì)粒、噬菌體和病毒等。據(jù)題意可知，把c-Myc等4個(gè)關(guān)鍵基因通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠的皮膚成纖維細(xì)胞，即在該技術(shù)中，逆轉(zhuǎn)錄病毒作為載體，它利用外殼蛋白與受體細(xì)胞表面的受體相互識(shí)別而感染皮膚成纖維細(xì)胞。要改造病毒外殼蛋白可用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，通過(guò)對(duì)基因修飾或基因合成對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造或制造一種新的蛋白質(zhì)。

（2）①據(jù)題意可知，經(jīng)特殊處理得到單層或雙層的帶DNA的脂質(zhì)體小泡，被受體細(xì)胞內(nèi)吞而實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移，而吞作用的過(guò)程中實(shí)現(xiàn)了膜的融合，因此脂質(zhì)體能介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，由于細(xì)胞壁對(duì)植物細(xì)胞起到支持與保護(hù)作用，因此轉(zhuǎn)移前植物受體細(xì)胞首先要去除細(xì)胞壁，以提高轉(zhuǎn)移效率。

②脂質(zhì)體是一種用卵磷脂等物質(zhì)制備的中空膜泡狀結(jié)構(gòu)的人工膜，而人工膜具有選擇性的基礎(chǔ)是其上的蛋白質(zhì)，而據(jù)題意可知脂質(zhì)體中無(wú)蛋白質(zhì)，因此脂質(zhì)體對(duì)受體細(xì)胞無(wú)選擇性。

③脂質(zhì)體通過(guò)與受體細(xì)胞膜的融合實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)移，由于脂質(zhì)體中無(wú)蛋白質(zhì)，故無(wú)免疫原性，不能使受體產(chǎn)生免疫反應(yīng)。

（3）使用培養(yǎng)液進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，為防止培養(yǎng)過(guò)程中雜菌污染，通常要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素。丙過(guò)程表示原代培養(yǎng)，形成的細(xì)胞株遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變，具有正常的二倍體核型。