Question

【題目】下圖為基因工程操作步驟示意圖。請回答下列問題：

（1）從基因文庫中提取的目的基因通過_____________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。與細(xì)胞內(nèi)同類酶相比，該技術(shù)所利用的DNA聚合酶所具有的特點(diǎn)是____________。

（2）在過程①中，需______________酶將已切開的載體DNA與目的基因結(jié)合成基因表達(dá)載體。載體DNA上必須要有標(biāo)記基因，標(biāo)記基因的作用是_______________________。過程②中若選用的受體細(xì)胞為大腸桿菌，一般需用Ca2+進(jìn)行處理，其目的是_______________________。

（3）若將病毒外殼蛋白基因?qū)�入酵母菌或哺乳動物�?xì)胞中，使之表達(dá)出病毒外殼蛋白（抗原），經(jīng)純化后而制得的疫苗可用于生產(chǎn)基因工程疫苗，接種基因工程疫苗比接種滅活減毒的病毒疫苗更安全，從疫苗的結(jié)構(gòu)組成來看，其原因是_______________________________________________。

Answer 1

【答案】PCR 耐高溫 DNA連接 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來（或篩選出含目的基因的受體細(xì)胞） 使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài) 基因工程疫苗僅具有病毒外殼蛋白，不具有遺傳物質(zhì)，不會出現(xiàn)病毒增殖和感染

【解析】

基因工程的基本步驟：1、目的基因的獲��；2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建；3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；4、目的基因的檢測與鑒定。

（1）通常使用PCR技術(shù)對目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。在PCR技術(shù)中應(yīng)用的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶，其特點(diǎn)是耐高溫。

（2）DNA連接酶能將已切開的載體DNA與目的基因連接起來形成磷酸二酯鍵；標(biāo)記基因的作用是鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來；由于未處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境DNA分子的能力較弱，所以常用Ca2+處理大腸桿菌，使大腸桿菌處于容易吸收周圍環(huán)境DNA分子的感受態(tài)。

（3）基因工程疫苗不含有遺傳物質(zhì)，可以引發(fā)機(jī)體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)形成抗體和記憶細(xì)胞，但由于其不增殖和感染人體，比常規(guī)疫苗安全性更高。