Question

小鼠是實(shí)驗(yàn)室常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，如：利用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體、利用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中導(dǎo)致了“基因敲除”技術(shù)的出現(xiàn)。

用小鼠制備抗X病毒單克隆抗體。

59．將小鼠等分為兩組，甲組定期間隔注射適量的含X病毒的溶液，其目的是____________________；乙組注射________________。

60．一段時(shí)間后，取甲組小鼠脾臟中的相應(yīng)細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合，細(xì)胞融合的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是_____________。融合形成的雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)是                   。

61．為了保存有價(jià)值的雜交瘤細(xì)胞系，通常用超低溫將其凍存，請(qǐng)分析其原____________

___________________。

    用小鼠進(jìn)行DNA重組研究中形成的“基因敲除”技術(shù)，能“敲除”DNA分子上的特定基因。該技術(shù)的主要過(guò)程如下：

第一步：分離小鼠胚胎干細(xì)胞，這些細(xì)胞中含有需要改造的基因，稱(chēng)“靶基因”。

第二步：獲取與“靶基因”同源的DNA片斷，利用特定技術(shù)在該DNA片段上插入neo^R基因（新霉素抗性基因）成為突變DNA（如下圖），使該片段上的靶基因失活。

第三步：將插入neo^R基因（新霉素抗性基因）的靶基因轉(zhuǎn)移入胚胎干細(xì)胞，再通過(guò)同源互換，用失活靶基因取代兩個(gè)正常靶基因中的一個(gè)，完成對(duì)胚胎干細(xì)胞的基因改造。

第四步：將第三步處理后的胚胎干細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到特定培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng)。

其基本原理如下圖所示：

62．第二步中neo^R基因插入靶基因使用的工具酶是                      。neo^R基因不僅能使靶基因失活，還是        ；“靶基因失活”的含義是             。

63．從研究者成功獲得如上圖所示的“敲除”一個(gè)靶基因的胚胎干細(xì)胞，到將該細(xì)胞培育成“基因敲除”小鼠，運(yùn)用到的生物技術(shù)有            、              等。

64．科學(xué)家可以通過(guò)“基因敲除”來(lái)研究基因的功能，63題中獲得的基因敲除小鼠，能否直接用來(lái)研究基因功能并說(shuō)明原因                                        。

Answer 1

59．獲得能產(chǎn)生抗X病毒抗體的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）    等量不含X病毒的溶液

60．細(xì)胞膜的流動(dòng)性    既能無(wú)限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體（抗X病毒的特異性抗體）

61．超低溫抑制酶活性，利于保存其特性

62．限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）、DNA連接酶    標(biāo)記基因    靶基因中的脫氧核苷酸數(shù)量序列發(fā)生改變，不能正常表達(dá)

63．克隆技術(shù)  轉(zhuǎn)基因技術(shù)（合理給分）

64．不能，因?yàn)樵撔∈篌w內(nèi)仍有一個(gè)正常的靶基因，也能表達(dá)性狀。故不能得到靶基因的功能（2分）