Question

【題目】通常DNA分子復制從一個復制起始點開始，有單向復制和雙向復制，如圖所示。

放射性越高的3H-胸腺嘧啶脫氧核糖核苷（3H-脫氧胸苷），在放射自顯影技術的圖像上，感光還原的銀顆粒密度越高。請利用放射性自顯影技術、低放射性3H-脫氧胸苷和高放射性3H-脫氧胸苷設計實驗以確定大腸桿菌DNA復制的方向，回答下列問題：

（1）實驗思路：復制開始時，首先用______培養(yǎng)大腸桿菌，一段時間后轉移到______中繼續(xù)培養(yǎng)，用放射自顯影技術觀察__________。

（2）實驗結果和結論：_______________________________。

Answer 1

【答案】含低放射性3H-脫氧胸苷培養(yǎng)基 含有高放射性3H-脫氧胸苷的培養(yǎng)基 復制起點和復制起點兩側銀顆粒密度情況 若復制起點處銀顆粒密度低，一側銀顆粒密度高，則DNA分子復制為單向復制；若復制起點處銀顆粒密度低，復制起點的兩側銀顆粒密度高，則DNA分子復制為雙向復制。

【解析】

由題意和圖示信息準確把握實驗目的(確定大腸桿菌DNA復制的方向)，從中挖掘出隱含的信息：①利用3H-脫氧胸苷使新合成的同一條DNA子鏈上出現(xiàn)低放射性區(qū)段和高放射性區(qū)段；②利用放射性自顯影技術，通過觀察復制起點及其兩側銀顆粒密度情況來判斷DNA復制的方向。在此基礎上對相關問題進行解答。

（1）依題意可知：該實驗的目的是確定大腸桿菌DNA復制的方向。實驗原理是：①放射性越高的3H-胸腺嘧啶脫氧核糖核苷(3H-脫氧胸苷)在放射自顯影技術的圖像上，感光還原的銀顆粒密度越高。②3H-脫氧胸苷是DNA復制的原料，依據(jù)DNA的半保留復制，利用3H標記的低放射性和高放射性的脫氧胸苷使新形成的同一條DNA子鏈上出現(xiàn)低放射性區(qū)段和高放射性區(qū)段。③利用放射性自顯影技術，檢測子鏈上銀顆粒密度的高低及其分布來判斷DNA復制的方向。綜上分析可知該實驗思路為：復制開始時，首先用含低放射性3H-脫氧胸苷培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，一段時間后轉移到含有高放射性3H-脫氧胸苷的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，用放射自顯影技術觀察復制起點和復制起點兩側銀顆粒密度情況。

（2）依據(jù)實驗思路可知:若DNA分子復制為單向復制，則復制起點處銀顆粒密度低，遠離復制起點的一側銀顆粒密度高。若DNA分子復制為雙向復制，則復制起點處銀顆粒密度低，復制起點的兩側銀顆粒密度高。