Question

【題目】我國目前臨床使用的乙肝疫苗大多為基因工程疫苗,其有效成分是乙肝表面抗原蛋白。下圖是將乙肝表面抗原基因轉(zhuǎn)移到煙草細(xì)胞內(nèi)生產(chǎn)乙肝疫苗的示意圖,請據(jù)圖回答下列問題。

（1）過程①表示 。為了使目的基因正常表達(dá)，其首端必須有 ，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位。若限制酶切出了平末端，要選擇 進行連接。（填“Ecoli DNA連接酶”或“T4 DNA連接酶”）

（2）圖中將乙肝表面抗原基因?qū)�入煙草�?xì)胞的方法稱為 。它是利用運載體Ti質(zhì)粒中含有__________序列，可以將目的基因整合到宿主細(xì)胞的染色體上。

（3）圖中將乙肝表面抗原基因?qū)�入煙草�?xì)胞后，長芽、生根的過程中采用了細(xì)胞工程的_______________技術(shù)，該技術(shù)的原理是 。

（4）檢測煙草植株細(xì)胞中乙肝表面抗原基因是否合成出乙肝表面抗原蛋白，采用的方法是 。

Answer 1

【答案】（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建 啟動子 T4DNA連接酶

（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 T-DNA

（3）植物組織培養(yǎng) 植物細(xì)胞具有全能性 抗原—抗體雜交法

【解析】

試題分析：（1）過程①表示目的基因和Ti質(zhì)粒的結(jié)合，即基因表達(dá)載體的構(gòu)建，為了使目的基因正常表達(dá)，其首端必須有啟動子，若限制酶切出了平末端，要選擇T4DNA連接酶進行連接，Ecoli DNA連接酶只能連接黏性末端。

（2）圖中借助農(nóng)桿菌將乙肝表面抗原基因?qū)�入煙草�?xì)胞，稱為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，它是利用運載體Ti質(zhì)粒中含有T-DNA序列，可以將目的基因轉(zhuǎn)移、整合到宿主細(xì)胞的染色體上。

（3）圖中將乙肝表面抗原基因?qū)�入煙草�?xì)胞后，長芽、生根的過程中采用了細(xì)胞工程的植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性。

（4）檢測煙草植株細(xì)胞中乙肝表面抗原基因是否合成出乙肝表面抗原蛋白，可采用分子水平的檢測，即抗原—抗體雜交法。