Question

近20年來，PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))成為分子生物學(xué)實驗室的一種常規(guī)實驗手段，其原理是利用DNA半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖)，在短時間內(nèi)，將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，從而使實驗室所需要的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。

(1)加熱使DNA雙鏈間的__________鍵完全打開，稱為________；而在細(xì)胞中是在________酶的作用下進(jìn)行的。

(2)如果只需要大量克隆模板DNA中間的某個特定區(qū)段，應(yīng)該加入________種特定的引物。當(dāng)溫度降低至55 ℃時，引物與兩條“舒展”的模板的特定位置結(jié)合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的________端連接脫氧核苷酸，兩條子鏈的延伸方向都是____________。

(3)PCR技術(shù)的必需條件，除了模板、原料、酶之外，至少還有三個條件，即液體環(huán)境、適宜的________和________，前者由________自動調(diào)控，后者則靠____來維持。

(4)通過PCR技術(shù)使DNA分子大量復(fù)制，如果將一個用¹⁵N標(biāo)記的DNA分子放入試管中，以¹⁴N標(biāo)記的脫氧核苷酸為原料，連續(xù)復(fù)制四次之后，則¹⁵N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是________。

 

Answer 1

【答案】

(1)氫　解旋　解旋   (2)兩　3′　從子鏈的5′端向3′端延伸  (3)溫度　酸堿度　PCR儀　緩沖液  (4)1/8

【解析】PCR技術(shù)加熱是使DNA雙鏈間氫鍵斷開，稱為解旋，在細(xì)胞內(nèi)是由解旋酶進(jìn)行的；將一個用¹⁵N標(biāo)記的DNA分子放入試管中連續(xù)復(fù)制四次，會得到2⁴=16個DNA分子，含¹⁵N的DNA分子有兩個（原因半保留復(fù)制），則¹⁵N標(biāo)記的DNA分子占全部DNA分子總數(shù)的比例是2/16=1/8。