Question

【題目】以小鼠腫瘤組織為實(shí)驗(yàn)材料，開展了一系列生物學(xué)研究，回答下列問題：

（1）將獲得的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋100倍后，用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板（規(guī)格為2mm×2mm×0．1mm）計(jì)數(shù)，觀察到的計(jì)數(shù)室中細(xì)胞分布如圖。

①培養(yǎng)液中腫瘤細(xì)胞的密度是_____________。

②若在實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，用滴管從靜置的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中取樣稀釋后再計(jì)數(shù)，則得到的結(jié)果比實(shí)際值_____________。

（2）某同學(xué)要利用該腫瘤細(xì)胞建立腫瘤小鼠模型，在給小鼠接種腫瘤細(xì)胞前用射線照射小鼠的_____________器官，降低小鼠的_____________功能，以增加建模成功率。

（3）TdR（胸腺嘧啶核苷）是常用的一種DNA合成抑制劑。適當(dāng)濃度的TdR就可阻斷DNA的正常復(fù)制，而不影響其他時(shí)期細(xì)胞的運(yùn)轉(zhuǎn)。某瘤細(xì)胞X各時(shí)期經(jīng)歷時(shí)間依次為G1期為10h、S期6h、G2期8h、M期1h。

科學(xué)家利用X細(xì)胞和TdR做了如下實(shí)驗(yàn)，每組設(shè)置多個(gè)重復(fù)樣品。（統(tǒng)計(jì)各時(shí)期細(xì)胞數(shù)所占百分比的具體方法不做要求）

分組：A組：培養(yǎng)液+X細(xì)胞+TdR（用生理鹽水配置）

B組：……

第一步：培養(yǎng)19h后，檢測(cè)統(tǒng)計(jì)A、B兩組各時(shí)期細(xì)胞數(shù)所占百分比（第一次檢測(cè)）。

第二步：……

檢測(cè)統(tǒng)計(jì)：A、B兩組各時(shí)期細(xì)胞數(shù)所占百分比（第二次檢測(cè)）

①寫出B組添加試劑情況_____________

②設(shè)計(jì)一張表格記錄A、B兩組第一次檢測(cè)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果，并將預(yù)期結(jié)果填入表中_____________

③科學(xué)家最終想要通過一系列處理使A組的所有細(xì)胞均處于G1和S期的交界處，以使細(xì)胞周期同步化，請(qǐng)將后續(xù)步驟補(bǔ)充完整。_____________

Answer 1

【答案】3．75×107個(gè)/mL 偏大或偏小 胸腺 細(xì)胞免疫 培養(yǎng)液+X細(xì)胞+生理鹽水

	G1	S	G2	M
A組	76%	24%	0%	0%
B組	40%	24%	32%	4%

將A組中的TdR全部洗去，更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)6h（6h-19h之間的任一時(shí)間均可），再向A組中加入TaR培養(yǎng)

【解析】

本題考查惡性腫瘤的防治，動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，然后，在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和增殖。

（1）①培養(yǎng)液中腫瘤細(xì)胞的密度是：（5+6+6+6+7）÷80×400÷（2×2×0.1×10-3）×100=3．75×107個(gè)/mL。

②用滴管從靜置的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中取樣，如果取樣位置偏上，則得到的結(jié)果比實(shí)際值偏低；如果取樣位置偏下，則得到的結(jié)果比實(shí)際值偏高。

（2）由于胸腺是T淋巴細(xì)胞成熟的場(chǎng)所，給小鼠接種腫瘤細(xì)胞前用射線照射小鼠的胸腺器官，降低小鼠的細(xì)胞免疫功能，以增加建模成功率。

（3）①為了排除生理鹽水對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，B組添加試劑情況為培養(yǎng)液+X細(xì)胞+生理鹽水。②設(shè)計(jì)一張表格記錄A、B兩組第一次檢測(cè)統(tǒng)計(jì)的結(jié)果，如下：

③科學(xué)家最終想要通過一系列處理使A組的所有細(xì)胞均處于G1和S期的交界處，以使細(xì)胞周期同步化，應(yīng)補(bǔ)充的步驟：將A組中的TdR全部洗去，更換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)6h（6h-19h之間的任一時(shí)間均可），再向A組中加入TaR培養(yǎng)。