Question

【題目】肥胖已經(jīng)嚴重危害人類健康．為研究發(fā)酵大麥提取物對3T3﹣L1前脂肪細胞分化的影響，科研人員進行了相關(guān)實驗．
（1）3T3﹣L1前脂肪細胞在胰島素（INS）、地塞米松（DEX）和3﹣異丁基﹣1﹣甲基﹣黃嘌呤（IBMX）的誘導下，基因表達，分化為成熟脂肪細胞，因此經(jīng)過三種物質(zhì)誘導的3T3﹣L1前脂肪細胞是肥胖研究常用的細胞模型．
（2）3T3﹣L1前脂肪細胞培養(yǎng)液中除了具有基本的營養(yǎng)外，還需加入一定量的 ， 并置于中培養(yǎng)．
（3）將一定數(shù)目的植物乳桿菌接種到經(jīng)過處理的粉碎過篩大麥和水的混合液中，制備發(fā)酵大麥提取物（LFBE）．除不接種植物乳桿菌外，其余操作方法相同，制備未發(fā)酵大麥提取物（RBE）．
（4）研究發(fā)酵大麥提取物對細胞分化的影響，實驗處理及結(jié)果如下．（表格中+表示加入了該物質(zhì)，﹣表示未加入）

組別 處理方法	模型組	空白組	對照組（提取物濃度ug/mL）			實驗組（提取物濃度ug/mL）
			100	200	400	100	200	400
培養(yǎng)液	+	+	+	+	+	+	+	+
1	+	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣
2	﹣	﹣	+	+	+	﹣	﹣	﹣
3	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	+	+	+

表格處理方法1，2，3分別是、、 ．
②分析實驗結(jié)果，說明 ．
（5）為進一步研究LFBE抑制3T3﹣L1前脂肪細胞分化的機理，科研人員提取各組細胞中總RNA，經(jīng)過程獲得cDNA，再利用PCR技術(shù)擴增出肥胖相關(guān)基因．在相同條件下，PCR產(chǎn)物的量可以間接反映細胞中的含量．若檢測結(jié)果是 ， 則說明LFBE抑制相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄從而抑制3T3﹣L1前脂肪細胞分化．

Answer 1

【答案】
（1）選擇性
（2）動物血清（可換成抗生素以防止污染）；CO2（恒溫）培養(yǎng)箱
（3）（高壓蒸汽）滅菌
（4）INS．DEX．IBMX；RBE；LFBE；LFBE明顯抑制3T3﹣L1前脂肪細胞分化且隨濃度增加，抑制能力加強
（5）逆轉(zhuǎn)錄；肥胖相關(guān)基因mRNA；LFBE組肥胖相關(guān)基因mRNA數(shù)量明顯低于模型組和RBE組，高于空白組
【解析】解：（1）細胞分化是基因選擇性表達的結(jié)果．（2）細胞培養(yǎng)液中除了具有基本的營養(yǎng)外，還需加入一定量的動物血清（可換成抗生素以防止污染），并置于 CO2（恒溫）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)．（3）培養(yǎng)基需要高壓蒸汽滅菌．（4）①本實驗是研究發(fā)酵大麥提取物對細胞分化的影響，根據(jù)題（1）中“3T3﹣L1前脂肪細胞在胰島素（INS）、地塞米松（DEX）和3﹣異丁基﹣1﹣甲基﹣黃嘌呤（IBMX）的誘導下，分化為成熟脂肪細胞”題（3）中“植物乳桿菌接種到粉碎過篩大麥和水的混合液中，制備發(fā)酵大麥提取物（LFBE）”等相關(guān)信息可推知，表格處理方法1、2、3分別是INS．DEX．IBMX、RBE、LFBE．②根據(jù)柱形圖，分析實驗結(jié)果，說明LFBE明顯抑制3T3﹣L1前脂肪細胞分化率且隨濃度增加，抑制能力加強．（5）RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA．PCR產(chǎn)物的量可以間接反映細胞中肥胖相關(guān)基因mRNA的含量．若檢測結(jié)果是 LFBE組肥胖相關(guān)基因mRNA數(shù)量明顯低于模型組和RBE組，高于空白組，則說明LFBE抑制相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄從而抑制3T3﹣L1前脂肪細胞分化． 所以答案是：（1）選擇性（2）動物血清（可換成抗生素以防止污染） CO2（恒溫）培養(yǎng)箱（3）（高壓蒸汽）滅菌（4）①INS．DEX．IBMX、RBE、LFBE ②LFBE明顯抑制3T3﹣L1前脂肪細胞分化且隨濃度增加，抑制能力加強（5）逆轉(zhuǎn)錄 肥胖相關(guān)基因mRNA LFBE組肥胖相關(guān)基因mRNA數(shù)量明顯低于模型組和RBE組，高于空白組
【考點精析】掌握細胞分化的基礎(chǔ)和實質(zhì)和動物細胞與組織培養(yǎng)過程是解答本題的根本，需要知道在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異，產(chǎn)生不同的細胞類群差異的過程；細胞分化是基因選擇性表達的結(jié)果；取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．