Question

【題目】下表是某種微生物培養(yǎng)基的配方表，請(qǐng)據(jù)表回答：

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	瓊脂	水
0.5g	1g	0.5g	2g	200mL

（1）此培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分有五類，其中蛋白胨提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是________________。

（2）在培養(yǎng)基制備過(guò)程中，各種成分溶化后分裝前，必須的操作是______________。

（3）微生物培養(yǎng)最基本的要求是無(wú)菌操作，下列對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌消毒方法的正確順序依次是______________。（填序號(hào)）

①化學(xué)消毒 ②高壓蒸汽滅菌 ③干熱滅菌 ④紫外滅菌 ⑤灼燒滅菌 ⑥巴氏消毒法

（4）巴氏消毒法與煮沸消毒法相比，其優(yōu)點(diǎn)是___________________。

（5）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，最好選擇群落在__________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。若統(tǒng)計(jì)出在一稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為30個(gè)，所用稀釋液的體積為0.2mL，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)為_______________________________________。

（6）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是_____________。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤有______________。

Answer 1

【答案】碳源、氮源、生長(zhǎng)因子 調(diào)節(jié)pH ②③⑤①④⑥ 在達(dá)到消毒目的的同時(shí)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少 30～300 1.5×107 接種環(huán) 接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開(kāi)始

【解析】

1、培養(yǎng)基的成分包括碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子．
2、制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的步驟為計(jì)算→稱量→溶化→調(diào)pH→滅菌→倒平板．
3、消毒和滅菌

4、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）微生物培養(yǎng)基的成分包括碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽和生長(zhǎng)因子。蛋白胨在培養(yǎng)基可以為微生物提供碳源、氮源和生長(zhǎng)因子。
（2）配制培養(yǎng)基時(shí)為保證無(wú)菌，各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行調(diào)節(jié)pH，然后再滅菌。
（3）培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，培養(yǎng)皿常用干熱滅菌法滅菌，接種環(huán)常用灼燒滅菌，雙手應(yīng)用化學(xué)藥劑消毒，空氣可用紫外線殺菌，牛奶常用巴氏消毒法消毒，故對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌消毒方法的正確順序依次是②③⑤①④⑥。

（4）與煮沸消毒法相比，巴氏消毒法在較低溫度下，既可以殺死病菌，又能保持物品中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失較少和風(fēng)味不變。
（5）使用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目時(shí)，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。若統(tǒng)計(jì)出在一稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為30個(gè)，所用稀釋液的體積為0.2mL，則每毫升樣品中的細(xì)菌數(shù)為30÷0.2×105=1.5×107個(gè)。