Question

【題目】生物技術(shù)實(shí)踐與人們生產(chǎn)和生活密切相關(guān)，也為許多學(xué)生將來(lái)就業(yè)奠定知識(shí)基礎(chǔ)和能力基礎(chǔ)．請(qǐng)回答下列有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐中的問(wèn)題：
（1）無(wú)菌技術(shù)主要通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染．常用的滅菌方法有滅菌、干熱滅菌和滅菌．
（2）在果醋、泡菜的制作過(guò)程中，需要氧氣的是；在制作果醋過(guò)程中，榨取的果汁非常渾濁，解決的方法是 ．
（3）果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作過(guò)程中主要利用的微生物分別為酵母菌、、、 ， 屬于原核生物的是 ， 只進(jìn)行無(wú)氧呼吸的是 ．
（4）在制備固定化酵母細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，海藻酸鈉的濃度對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較大，若濃度過(guò)高，則 ， 通常評(píng)價(jià)該實(shí)驗(yàn)結(jié)果主要是觀察凝膠珠的 ．
（5）DNA粗提取與鑒定
①利用DNA在不同濃度的溶液中溶解度的不同，通過(guò)控制其溶液的濃度去除雜質(zhì)．
②DNA的析出：將處理后的溶液過(guò)濾，加入與濾液體積相等的、溶液可使DNA析出．
③DNA的鑒定：將析出的DNA溶于物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液中，加入 ， 沸水浴加熱，溶液變藍(lán)．
（6）血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)中，在洗脫過(guò)程中加入物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液（pH為7.0）的目的是 ．
（7）提取植物芳香油時(shí)可采用的方法有、和 ．
（8）玫瑰油被稱為“液體黃金”，是世界香料工業(yè)中不可取代的原料，多用于制造高級(jí)香水等化妝品．如圖表示提取玫瑰油的流程，其中A表示；B表示 ， 其中加入NaCl的作用是 ．

（9）植物芳香油溶解性的特點(diǎn)是難溶于 ， 易溶于 ， 因此可用后者作為提取劑來(lái)提取植物芳香油．
（10）若利用組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)玫瑰進(jìn)行無(wú)性繁殖，玫瑰的組織培養(yǎng)需在培養(yǎng)基上進(jìn)行，選取 ， 沖洗干凈后，用無(wú)菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70%的中搖動(dòng)2～3次，外植體再經(jīng)過(guò)和過(guò)程培育成植株幼苗，該過(guò)程的關(guān)鍵激素是、 ．
（11）殺蟲基因通過(guò)①﹣④，最終在宿主細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程叫做；其中（填標(biāo)號(hào)）是轉(zhuǎn)基因抗蟲水稻的核心步驟，需要的工具酶是、 ．
（12）“華恢1號(hào)”的培育過(guò)程應(yīng)用的主要生物技術(shù)有、 ．
（13）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，常用Ti質(zhì)粒作為載體，是因?yàn)門i質(zhì)粒上具有 ， 它能把目的基因整合到受體細(xì)胞（植株細(xì)胞）中上．
（14）圖2是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（部分基因及部分限制酶作用位點(diǎn)），組建理想的載體需要對(duì)天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造．據(jù)圖分析：
①人工改造質(zhì)粒時(shí)，要使抗蟲基因表達(dá)，還應(yīng)插入 ， 其作用是 ．
②人工改造質(zhì)粒時(shí)，先用限制酶Ⅰ處理，可以去除質(zhì)粒上的基因和基因（填上圖質(zhì)粒上的基因名稱），保證重組質(zhì)粒進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)促進(jìn)細(xì)胞的分裂和生長(zhǎng)；然后再用限制酶Ⅱ分別切割經(jīng)過(guò)改造的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒，那么成功導(dǎo)入抗蟲基因的水稻胚細(xì)胞將不能在含（填抗生素名稱）的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)．
（15）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要利用酶處理組織塊，使其分散成單個(gè)細(xì)胞；培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞表現(xiàn)出和等特點(diǎn)；通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的 ， 以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染，另外通常需加入等一些天然成分．
（16）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是 ， 單克隆抗體與普通血清抗體相比較，具有并可能大量制備的特點(diǎn)．
（17）植物體細(xì)胞雜交之前，需要用去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的 ， 一般用作為誘導(dǎo)劑來(lái)誘導(dǎo)其融合．
（18）試管牛的生產(chǎn)過(guò)程中，在試管中完成的步驟為和 ， 將胚胎培養(yǎng)發(fā)育至階段再移植到代孕母體體內(nèi)．
（19）對(duì)污染的礦山進(jìn)行生態(tài)修復(fù)，一般選用耐重金屬污染的本地植物進(jìn)行種植，體現(xiàn)了生態(tài)工程的原理．

Answer 1

【答案】
（1）灼燒；高壓蒸汽（答案順序可顛倒）
（2）果醋；用果膠酶處理
（3）醋酸菌；毛霉；乳酸菌；醋酸菌和乳酸菌；乳酸菌
（4）不易形成凝膠珠；顏色和形狀
（5）NaCl；（體積分?jǐn)?shù)為95%的）酒精溶液；二苯胺
（6）準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)的一致
（7）萃取法；蒸餾法；壓榨法
（8）水蒸氣蒸餾；無(wú)水硫酸鈉；增加鹽的濃度，使油和水出現(xiàn)明顯的分層
（9）水；有機(jī)溶劑
（10）MS；生長(zhǎng)旺盛的嫩枝；酒精；脫分化；再分化；細(xì)胞分裂素；生長(zhǎng)素
（11）轉(zhuǎn)化；①；限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）；DNA連接酶
（12）基因工程技術(shù)（轉(zhuǎn)基因技術(shù)）；植物組織培養(yǎng)技術(shù)
（13）T﹣DNA；染色體的DNA
（14）啟動(dòng)子；RNA聚合酶提供識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄；tms；tmr；四環(huán)素
（15）胰蛋白酶或膠原蛋白酶；細(xì)胞貼壁；接觸抑制；抗生素；血清、血漿
（16）既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體；特異性強(qiáng)、靈敏度高
（17）纖維素酶和果膠酶；原生質(zhì)體；聚乙二醇（PEG）
（18）體外受精；胚胎的早期培養(yǎng)；桑椹胚或囊胚
（19）協(xié)調(diào)與平衡
【解析】解：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要利用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理組織塊，使其分散成單個(gè)細(xì)胞；培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞表現(xiàn)出細(xì)胞貼壁和接觸抑制等特點(diǎn)；通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染，另外通常需加入血清、血漿等一些天然成分．（2）雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高并可能大量制備的特點(diǎn)．（3）植物體細(xì)胞雜交之前，需要用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體，一般用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑來(lái)誘導(dǎo)其融合．（4）試管牛的生產(chǎn)過(guò)程中，在試管中完成的步驟為體外受精 和胚胎的早期培養(yǎng)，將胚胎培養(yǎng)發(fā)育至桑椹胚或囊胚階段再移植到代孕母體體內(nèi)．（5）對(duì)污染的礦山進(jìn)行生態(tài)修復(fù)，一般選用耐重金屬污染的本地植物進(jìn)行種植，體現(xiàn)了生態(tài)工程的 協(xié)調(diào)與平衡原理．
【考點(diǎn)精析】認(rèn)真審題，首先需要了解動(dòng)物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過(guò)程(取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng))，還要掌握單克隆抗體的制備(對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細(xì)胞；同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提�。淮偈顾鼈兗�(xì)胞融合；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞；然后對(duì)它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；最后將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體)的相關(guān)知識(shí)才是答題的關(guān)鍵．