Question

【題目】如圖表示轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的培育過程，請回答相關(guān)問題：
（1）如果用馬鈴薯發(fā)育的某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群就叫做馬鈴薯的 ．
（2）據(jù)圖分析，構(gòu)建重組質(zhì)粒時，用酶對含目的基因的DNA和質(zhì)粒同時進(jìn)行處理．
（3）重組質(zhì)粒中，目的基因的兩端還必須有和終止子．用含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞后，采用技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的上是否插入了目的基因，同時還要采用 技術(shù)檢測目的基因是否在轉(zhuǎn)基因馬鈴薯細(xì)胞中表達(dá)．
（4）培育愈傷組織的固體培養(yǎng)基中，除了無機鹽、有機營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂、卡那霉素外，還需添加的物質(zhì)是 ， 添加卡那霉素的作用 ．

Answer 1

【答案】
（1）多種cDNA；cDNA（部分基因）文庫
（2）Pst、EcoR I
（3）啟動子；DNA分子雜交；染色體的DNA；抗原﹣抗體雜交
（4）植物激素；篩選含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞
【解析】解：（1）用馬鈴薯發(fā)育的某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種cDNA片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群就叫做馬鈴薯的cDNA文庫．（2）含有目的基因的外源DNA分子中含有三種限制酶的識別序列和切割位點，但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上，用該酶切割會破壞目的基因，因此構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應(yīng)使用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ．（3）重組質(zhì)粒中，目的基因的兩端還必須有啟動子和終止子．用含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞后，檢測目的基因是否插入馬鈴薯染色體的DNA上可采用DNA分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否在轉(zhuǎn)基因馬鈴薯細(xì)胞中表達(dá)，可采用抗原﹣抗體雜交技術(shù)．（4）培育愈傷組織的固體培養(yǎng)基中，除了無機鹽、有機營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂、卡那霉素外，還需添加植物激素（細(xì)胞分裂素和生長素）；由圖可知，抗卡那霉素基因為抗性基因，因此培養(yǎng)基中添加卡那霉素的作用是篩選含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞． 所以答案是：（1）多種cDNA；cDNA（部分基因）文庫；（2）Pst、EcoR I；（3）啟動子；DNA分子雜交；染色體的DNA；抗原﹣抗體雜交；（4）植物激素；篩選含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞
【考點精析】通過靈活運用基因工程的原理及技術(shù)，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)即可以解答此題．