Question

【題目】（生物—生物技術(shù)實踐）

乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，具有重要應(yīng)用價值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下：

(1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L時，宜用__________作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊脂的作用是___________。從功能上講，這種培養(yǎng)基屬于___________。

(2)培養(yǎng)微生物L前，宜采用__________方法對接種環(huán)進(jìn)行滅菌。

(3)純化后的乳糖酶可用電泳法檢測其分子量大小。在相同條件下，帶電荷相同的蛋白質(zhì)電泳速度越快，說明其分子量越___________.

(4)乳糖酶宜采用化學(xué)結(jié)合法（共價鍵結(jié)合法）進(jìn)行固定化，可通過檢測固定化乳糖酶的___________確定其應(yīng)用價值。除化學(xué)結(jié)合法外，酶的固定化方法還包括___________、_____________、離子吸附法及交聯(lián)法等。

Answer 1

【答案】乳糖 凝固劑 選擇培養(yǎng)基 灼燒 小 （酶）活性[或（酶）活力] 包埋法 物理吸附法

【解析】

（1）已知乳糖乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L時，宜用乳糖作為培養(yǎng)基中的唯一碳源，培養(yǎng)基中瓊脂的作用是凝固劑，從功能上講，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）為了避免雜菌污染，在培養(yǎng)微生物前，對接種環(huán)等接種工具應(yīng)采用灼燒滅菌。

（3）用電泳法純化乳糖酶時，若在相同條件下分離帶電荷相同的蛋白質(zhì)，則其分子量越小，電泳速度越快。

（4）固定化酶的應(yīng)用價值與酶的活性（或活力）有關(guān)，因此用化學(xué)結(jié)合法固定化乳糖酶時，可通過檢測固定化乳糖酶的活性（或活力）來確定其應(yīng)用價值。固定酶化的方法包括化學(xué)結(jié)合法、包埋法、物理吸附法、離子吸附法及交聯(lián)法等。