Question

【題目】科研人員利用胚胎干細(xì)胞對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療，其技術(shù)流程如圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）過(guò)程①獲得重組胚胎之前需要通過(guò)____________技術(shù)獲得重組細(xì)胞，接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于_______時(shí)期，并用微型吸管吸出其細(xì)胞核。

（2）步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其__________分離出ES細(xì)胞，ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細(xì)胞核大、核仁明顯，在功能上具有__________________。

（3）步驟③中，需要構(gòu)建含干擾素基因的______，構(gòu)建之前可以利用______技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。

（4）步驟③中將基因?qū)�入ES細(xì)胞的方法通常是____________法，為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用____________________技術(shù)。

Answer 1

【答案】 核移植 MⅡ 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 發(fā)育的全能性 （基因）表達(dá)載體 PCR 顯微注射 DNA分子雜交

【解析】【試題分析】

本題結(jié)合利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的流程圖，綜合考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程和細(xì)胞工程的操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)；識(shí)記核移植技術(shù)的過(guò)程及應(yīng)用；識(shí)記胚胎干細(xì)胞的來(lái)源及特點(diǎn)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。分析題圖：圖示為利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的流程，其中①表示獲得重組胚胎的過(guò)程；②表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程；③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞。

（1）分析圖形可知，圖中過(guò)程①是體細(xì)胞核移植，在獲得重組胚胎之前需要通過(guò)核移植技術(shù)獲得重組細(xì)胞；接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于MⅡ時(shí)期，并用微型吸管吸出其細(xì)胞核。

（2）步驟②是早期胚胎培養(yǎng)，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞；ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為細(xì)胞核大、核仁明顯，在功能上具有發(fā)育的全能性。

（3）步驟③是目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程，需要構(gòu)建含干擾素基因的（基因）表達(dá)載體；構(gòu)建之前可以利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。

（4）步驟③中將基因?qū)��?/span>ES細(xì)胞的方法通常是顯微注射法；為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因，可采用DNA分子雜交技術(shù)，若檢測(cè)出雜交帶，則說(shuō)明ES細(xì)胞的DNA上插入了干擾素基因。