Question

【題目】a干擾素是由人的白細(xì)胞產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì),是抗病毒的一類特效藥,人類利用基因工程技術(shù)已經(jīng)大批量生產(chǎn)a干擾素。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題:

(1)利用逆轉(zhuǎn)錄的方法合成干擾素基因,不能從上皮細(xì)胞中提取mRNA,原因是______;這種方法合成的基因與細(xì)胞內(nèi)的基因相比,一般沒(méi)有______、啟動(dòng)子、終止子等結(jié)構(gòu)。

(2)根據(jù)α干擾素基因的脫氧核苷酸序列設(shè)計(jì)并合成引物,利用______技術(shù)可得到大量的α干擾素基因。

(3)基因工程中利用的工具酶有______,最常用的載體是______。

(4)將重組DNA導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞時(shí),需用______處理細(xì)胞使其成為______細(xì)胞。

Answer 1

【答案】上皮細(xì)胞中α干擾素基因不轉(zhuǎn)錄內(nèi)含子PCR限制酶、DNA連接酶質(zhì)粒Ca2+感受態(tài)

【解析】

基因工程常考的3種基本工具：

(1)限制性核酸內(nèi)切酶：識(shí)別特定核苷酸序列，并在特定位點(diǎn)上切割DNA分子。

(2)DNA連接酶：①E·coliDNA連接酶只能連接黏性末端；②T4DNA連接酶能連接黏性末端和平末端。

(3)運(yùn)載體：①能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定存在并大量復(fù)制；②有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)；③具有特殊的標(biāo)記基因——以便對(duì)含目的基因的受體細(xì)胞篩選。

（1）α干擾素是由人的白細(xì)胞產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)，上皮細(xì)胞不能轉(zhuǎn)錄α干擾素的基因。用逆轉(zhuǎn)錄法合成的基因沒(méi)有啟動(dòng)子、終止子、內(nèi)含子等結(jié)構(gòu)，必須構(gòu)建基因表達(dá)載體后，才能在受體細(xì)胞中表達(dá)。

（2）要得到大量的α干擾素基因，可利用PCR擴(kuò)增技術(shù)。

（3）基因工程技術(shù)需要用到三種工具，DNA連接酶和限制酶是基因工程中利用的工具酶，質(zhì)粒是最常用的載體。

（4）將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法，即常用Ca2+處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，在一定溫度條件下完成轉(zhuǎn)化。