Question

【題目】如圖是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ表示三種限制酶。請據(jù)圖回答：

（1）經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得的人乳鐵蛋白基因，可通過_____技術(shù)進行擴增。該技術(shù)使用的DNA聚合酶最主要的特點是_____。

（2）將人乳鐵蛋白基因插入載體時，需選用_____限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因�；�因表達載體除目的基因外，還必須有復制原點、_____、終止子和標記基因等。

（3）過程①常用的操作方法是_____法。導入目的基因后應在含_____的培養(yǎng)基上進行篩選含有重組載體的受精卵。

（4）進行過程②之前，需用相應的激素處理代孕牛，使其處于_____狀態(tài)。

（5）對早期胚胎進行分割，可獲得多個新個體，該種生殖方式屬于_____。

Answer 1

【答案】PCR 耐高溫 BamHⅠ、HindⅢ 啟動子 顯微注射 氨芐青霉素 同期發(fā)情 無性生殖

【解析】

分析題圖：圖示是培育表達人乳鐵蛋白的乳腺生物反應器的技術(shù)路線，包括基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細胞、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等步驟，其中過程①是將重組質(zhì)粒導入受體細胞；過程②需采用胚胎移植技術(shù)。

（1）經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得的人乳鐵蛋白基因，可通過PCR技術(shù)進行擴增。該技術(shù)使用的DNA聚合酶最主要的特點是耐高溫。

（2）根據(jù)載體和人乳鐵蛋白基因上限制酶種類和切點可知，將人乳鐵蛋白基因插入載體時，需選用BamHⅠ、HindⅢ限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因�；�因表達載體除目的基因外，還必須有復制原點、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）過程①常用顯微注射法將目的基因?qū)�入受精卵。導入目的基因后應在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行篩選含有重組載體的受精卵。

（4）進行過程②胚胎移植之前，需用相應的激素處理代孕牛，使其處于同期發(fā)情狀態(tài)。

（5）對早期胚胎進行分割，可獲得多個新個體，該種生殖方式屬于無性生殖。