Question

【題目】干擾素是一種抗病毒特效藥，傳統(tǒng)方法提取難度大，價(jià)格昂貴。某制藥公司通過下圖方式生產(chǎn)干擾素。請(qǐng)據(jù)圖回答。

（1）干擾素是動(dòng)物或人體細(xì)胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種_____________________。

（2）研究證明，DNA分子復(fù)制時(shí)，子鏈延伸的方向是5′→3′。構(gòu)建基因表達(dá)載體前要利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因，可以從圖二中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取___________作為引物。綜合圖二、圖三分析，對(duì)含干擾素基因的DNA片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí)，可選用的限制酶組合為___________。

（3）若要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛乳汁中含有人的干擾素，構(gòu)建的基因表達(dá)載體應(yīng)含有牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子，原因是_________________________________。

（4）圖一中A過程為_____________，該過程要注意_____________，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

（5）為了實(shí)現(xiàn)干擾素的批量生產(chǎn)，早期胚胎移植之前要進(jìn)行質(zhì)量檢測，并選擇細(xì)胞中的性染色體組成為_____________的早期胚胎進(jìn)行移植。圖一中B、C過程移入受體的胚胎能夠在受體內(nèi)存活的原因是__________________________。

Answer 1

【答案】糖蛋白 B、C Hind Ⅲ和PstⅠ或EcoRⅠ和Pst Ⅰ 促使干擾素基因在乳腺細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄 胚胎分割 將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割 XX 受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

【解析】

1、基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因

啟動(dòng)子在基因的首段，它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束；標(biāo)記基因便于目的基因的鑒定和篩選。

2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

3、胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)）。

（1）干擾素是動(dòng)物或人體細(xì)胞受到病毒侵染后產(chǎn)生的一種糖蛋白，幾乎能抵抗所有病毒引起的感染。

（2）根據(jù)題中信息，DNA分子復(fù)制時(shí)，子鏈延伸的方向是5′→3′，因此構(gòu)建前利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，可以從圖二中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取B和C作為引物。綜合圖二、圖三分析，SamⅠ酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)位于目的基因上，用該酶切割會(huì)破壞目的基因，因此對(duì)干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí)，可選用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ。

（3）若要使獲得的轉(zhuǎn)基因牛乳汁中含有人的干擾素，構(gòu)建的基因表達(dá)載體應(yīng)含有牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子，以促使干擾素基因在乳腺細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄。

（4）圖一中A過程為胚胎分割，該過程要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

（5）只有雌性奶牛才能產(chǎn)奶，因此要求早期胚胎細(xì)胞中的性染色體組成為XX，選擇發(fā)育良好的囊胚或桑椹胚胚進(jìn)行移植。由于受體對(duì)移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，所以圖一中B、C過程移入受體的胚胎能夠在受體內(nèi)存活。