Question

【題目】回答下列(1)、(2)小題：
（1）隨著社會的發(fā)展，石油產(chǎn)品的使用越來越多，石油烴污染也越來越嚴(yán)重。為了篩選出分解石油烴能力強(qiáng)的微生物，人們不斷地進(jìn)行研究。下圖為獲取能分離出分解石油烴的微生物的土壤樣品后的研究過程，請回答有關(guān)問題：

⑴獲取土壤樣品的取樣地點(diǎn)最好選在。為了能有效地分離出分解石油烴的微生物，過程①④所用的選擇培養(yǎng)基只能以石油烴作為唯一碳源，其原因是。
⑵根據(jù)⑤平板上生長的菌落，對④進(jìn)行接種采用的方法是法，若發(fā)現(xiàn)在⑤中無法區(qū)分菌落，可以將圖中③取出的菌液。
⑶純化菌株時，通常使用的劃線工具是。采用方法對其進(jìn)行滅菌。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤是(寫出一點(diǎn)即可)。
（2）毛角蛋白Ⅱ型中間絲(KIFⅡ)基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖。

⑴獲取外源基因用到的工具酶是。
⑵在過程②中，用酶處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細(xì)胞。把一個單細(xì)胞從群體中分離出來單獨(dú)培養(yǎng)，使之繁衍成一個新的細(xì)胞群體的技術(shù)，叫細(xì)胞克隆。未經(jīng)克隆化的細(xì)胞系具有性。由于人們對動物細(xì)胞所需營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此在培養(yǎng)細(xì)胞時需在培養(yǎng)基中加入一定量的 ， 在培養(yǎng)過程中應(yīng)將培養(yǎng)瓶置于培養(yǎng)。
⑶若要獲得多只相同的轉(zhuǎn)基因山羊，可對圖中早期胚胎進(jìn)行后進(jìn)行胚胎移植。
⑷下列有關(guān)轉(zhuǎn)基因山羊培育過程的敘述，錯誤的是。
A．圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來自導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞
B．重組細(xì)胞最初分裂時開始進(jìn)行DNA復(fù)制和基因的轉(zhuǎn)錄
C．將早期胚胎(如早期囊胚)植入到代孕母羊的輸卵管或子宮角部位
D．如果KIFⅡ基因的序列是已知的，則可用化學(xué)方法合成或用聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增該基因

Answer 1

【答案】
（1）石油烴污染明顯處,只有能利用石油烴的微生物能正常生長繁殖,涂布分離,進(jìn)行（梯度）稀釋,接種環(huán),灼燒,接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始劃線
（2）限制性核酸內(nèi)切酶,胰蛋白酶,異質(zhì),動物血清,CO2培養(yǎng)箱,胚胎分割,B
【解析】解：（1）⑴要獲取相應(yīng)的菌種，應(yīng)到相應(yīng)的環(huán)境中獲取，獲取土壤樣品的取樣地點(diǎn)最好選在石油污染明顯處。⑵常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌和消毒方法依次：高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。⑶接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落。(2）分析題圖：圖示是獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程圖，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示動物細(xì)胞培養(yǎng)過程；③表示從成年母絨山羊中獲取卵母細(xì)胞。⑴表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，其次還要用DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子。⑵②表示動物細(xì)胞培養(yǎng)過程，該過程中要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理將皮膚組織塊，使之分散成單個成纖維細(xì)胞。未經(jīng)克隆化的細(xì)胞系具有異質(zhì)性。由于人們對動物細(xì)胞所需營養(yǎng)物質(zhì)還沒有完全搞清楚，因此在培養(yǎng)細(xì)胞時需在培養(yǎng)基中加入一定量的動物血清，在培養(yǎng)過程中應(yīng)將培養(yǎng)瓶置于CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。⑶從重組細(xì)胞到早期胚胎需要采用（早期）胚胎培養(yǎng)技術(shù)．在胚胎移植前，通過胚胎分割技術(shù)可獲得較多胚胎。⑷A.圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來自導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞，A正確；

B.重組細(xì)胞最初分裂前就有基因的轉(zhuǎn)錄，B錯誤；

C.將早期胚胎（如早期囊胚）植入到代孕母羊的輸卵管或子宮角部位，便于早起胚胎的著床，C正確；

D.化學(xué)方法合成或用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增可用于獲取已知序列的目的基因，D正確

【考點(diǎn)精析】根據(jù)題目的已知條件，利用基因工程的原理及技術(shù)和胚胎分割移植的相關(guān)知識可以得到問題的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)；胚胎分割是用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2、4、8等分等，經(jīng)移植獲得同卵雙胎或多胎的技術(shù)．由于來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，因此胚胎分割可看作是動物無性繁殖或克隆的方法之一．