Question

【題目】【加試題】回答下列（一）、（二）小題。

(一）某研究小組欲用蘋果汁為原料，利用發(fā)酵瓶制作果酒和果醋，請分析回答：

(1)將蘋果汁放入發(fā)酵瓶，要預留約_________的空間。為得到酒精和糖含量較高的果酒，可在果汁中加入一定比例的_______。若發(fā)酵瓶內持續(xù)無氣泡產生，則需加入更多的________，使發(fā)酵作用盡快發(fā)生。

(2)變酸的果酒表面有一層醋桿菌形成的菌膜，若要在該菌膜中篩選高表達量的醋桿菌菌株，可通過獲得________的方法來分離篩選。若要統(tǒng)計獲得菌種的數(shù)目，則常采用__________法。對獲得的優(yōu)質醋桿菌菌種常用劃線法接種在固體培養(yǎng)基_______上低溫保存。

(3)下圖是果酒和果醋的發(fā)酵裝置，關于果醋發(fā)酵敘述錯誤的是________

A.發(fā)酵前，瓶內酒—水混合物的pH需調至7.0

B.發(fā)酵過程中，充氣口要適時適量充氣

C.發(fā)酵過程中，排氣口排出醋酸發(fā)酵產生的CO2

D.發(fā)酵完成后，出料口的pH值不再減少

(二）請回答雜交瘤技術和單克隆抗體制備的有關問題。

(1)雜交瘤技術制備單克隆抗體時，利用一定的物質，如生物誘導劑______作介導，使經免疫的小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出融合的細胞再進行細胞的_______培養(yǎng)，獲得純系細胞，同時還要進行____檢驗，以保證獲得的是所需的特定雜交瘤細胞。

(2)獲得雜交瘤細胞后，在體外培養(yǎng)時需要特別加入的天然成分是___________。

(3)有關雜交瘤細胞體外培養(yǎng)的敘述，正確的是_________

A.用固體培養(yǎng)基培養(yǎng) B.用滋養(yǎng)層細胞支持生長

C.能進行傳代培養(yǎng) D.需要對細胞進行研磨破碎獲得產物

(4)現(xiàn)在欲利用基因工程技術生產單克隆抗體，科研小組將與抗體形成有關的關鍵基因通過噬菌體導人到受體細胞，該技術的核心步驟是_________,噬菌體是這些關鍵基因的____________。

Answer 1

【答案】 1/3 蔗糖 酵母菌 單菌落 涂布分離 斜面 C 滅活的（仙臺）病毒 克隆 抗體 動物血清 C 形成重組DNA分子 載體

【解析】【試題分析】

（一）在果酒制作過程的前期通入空氣要在發(fā)酵瓶中留有一定的空間（大約1/3），可以給酵母菌提供氧氣，使其進行有氧呼吸，為酵母菌的生長、增殖提供能量，酵母菌迅速增殖，縮短發(fā)酵時間；能夠測定樣品中活菌數(shù)的方法是稀釋涂布平板法；臨時保藏的菌種一般是用劃線法把菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上低溫保存。

（二）（1）誘導動物細胞融合的方法有：聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等；在單克隆抗體制備過程中，一般認為有兩次篩選過程，第一次是篩選出雜交瘤細胞(用選擇培養(yǎng)基)，第二次是進一步篩選出能產生人們所需要抗體的雜交瘤細胞。

（2）動物細胞培養(yǎng)過程中，除正常的有機和無機營養(yǎng)外，還需加入血清、血漿等一些天然成分。

（一）（1）在果酒制作過程中，將蘋果汁放入發(fā)酵瓶，要預留約1/3的空間；為得到酒精和糖含量較高的果酒，可在果汁中加入一定比例的蔗糖；若發(fā)酵瓶內持續(xù)無氣泡產生，則說明酵母菌數(shù)量較少，需加入更多的酵母菌，使發(fā)酵作用盡快發(fā)生。

（2）若要在果酒表面有一層醋桿菌形成的菌膜中篩選高表達量的醋桿菌菌株，可通過獲得單菌落的方法來分離篩選；若要統(tǒng)計獲得菌種的數(shù)目，則常采用涂布分離法；對獲得的優(yōu)質醋桿菌菌種常用劃線法接種在固體培養(yǎng)基斜面上低溫保存。

（3）發(fā)酵前，瓶內酒—水混合物的pH需調至7.0，以縮短制作果醋的周期，A項正確；醋酸發(fā)酵為有氧發(fā)酵，所以發(fā)酵過程中，充氣口要適時適量充氣，B項正確；排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出CO2的，C項錯誤；出料口是用來取樣的，當出料口的pH值不再減少時，說明發(fā)酵已經完成，D項正確。

（二）（1）制備單克隆抗體時，可利用生物誘導劑滅活的（仙臺）病毒介導，使經免疫的小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合；為保證獲得的是所需的特定雜交瘤細胞，篩選出融合的細胞后需再進行細胞的克隆化培養(yǎng)，獲得純系細胞，同時還要進行抗體檢驗。

（2）獲得雜交瘤細胞后，在體外培養(yǎng)時需要特別加入的天然成分是動物血清。

（3）動物細胞培養(yǎng)需用液體培養(yǎng)基，A項錯誤；細胞克隆需要以滋養(yǎng)細胞（如經射線照射本身失去增殖能力的小鼠成纖維細胞）提供營養(yǎng)支持生長，B項錯誤；雜交瘤細胞在適宜條件下能無限增殖，所以能能進行傳代培養(yǎng)，C項正確；雜交瘤細胞產生的抗體會分泌到培養(yǎng)液中，所以不需要對細胞進行研磨破碎獲得產物，D項錯誤。

（4）基因工程的核心步驟是形成重組DNA分子；噬菌體可在基因工程中作為目的基因的載體。