Question

【題目】基因敲除技術是指通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的�；�因敲除技術常用于建立某種特定基因缺失的生物模型。例如，基因敲除模式小鼠制備技術圖解如下：

請回答：

（1）圖中ES細胞（胚胎干細胞）存在囊胚的_______部位，它具有體積小、細胞核大、____________的特點。

（2）neor(新霉素抗性基因)位于基因表達載體的________和_________之間。

（3）轉染ES細胞過程既可采用電穿孔法，亦可采用_________法。

（4）篩選中靶ES細胞需在動物細胞培養(yǎng)液中添加_____，圖中字母X過程采用_____技術。

（5）嵌合鼠和白色純合體小鼠交配產生的后代有___種表現(xiàn)型，其中黑色鼠是被破壞基因X的_____（填“純合體”或“雜合體”）。

Answer 1

【答案】內細胞團 核仁明顯 啟動子 終止子 顯微注射法 新霉素 胚胎移植 2 雜合體

【解析】

囊胚包括內細胞團和滋養(yǎng)層，其中內細胞團細胞，具有發(fā)育的全能性，屬于胚胎干細胞，具有體積小、細胞核大、核仁明顯的特點。

基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質抗原抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）圖中ES細胞（胚胎干細胞）存在囊胚的內細胞團部位，它具有體積小、細胞核大、核仁明顯的特點。

（2）neor(新霉素抗性基因)位于基因表達載體的啟動子和終止子之間。

（3）轉染ES細胞過程既可采用電穿孔法，亦可采用顯微注射法。

（4）篩選中靶ES細胞需在動物細胞培養(yǎng)液中添加新霉素，圖中字母X表示將胚胎移入代孕母鼠，該過程采用胚胎移植技術。

（5）嵌合鼠和白色純合體小鼠交配產生的后代有2種表現(xiàn)型，其中黑色鼠是被破壞基因X的雜合體。