Question

【題目】為了分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，科研人員利用被石油污染過的土壤進(jìn)行如圖A所示的實(shí)驗(yàn)。

（1）配制好的培養(yǎng)基滅菌通常可以使用_________法。步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是_______________________________。

（2）同學(xué)甲進(jìn)行過程④的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖B所示。該同學(xué)的接種方法是___________；推測(cè)同學(xué)甲用此方法接種時(shí)出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的操作失誤是________________；在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是____________________。

（3）同學(xué)乙也按照同學(xué)甲的接種方法進(jìn)行了過程④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、58和57。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為________________。

（4）步驟⑤需要震蕩培養(yǎng)其目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時(shí)使__________，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率。

（5）步驟⑤后取樣測(cè)定石油含量的目的是____________________。

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌 石油是唯一碳源 稀釋涂布平板法 涂布不均勻 檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 5.7×107 菌體與培養(yǎng)液充分接觸 篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌

【解析】本題考查分解石油的細(xì)菌的篩選，要求考生明確微生物的接種、篩選方法，能根據(jù)所學(xué)知識(shí)分析操作流程圖，篩選出所需要的石油分解菌，并能對(duì)計(jì)數(shù)結(jié)果進(jìn)行計(jì)算。

（1）根據(jù)題意，要分離和純化高效分解石油的細(xì)菌，配制好的培養(yǎng)基滅菌通常可以使用高壓蒸汽滅菌法。圖中步驟②是擴(kuò)大培養(yǎng)來自被石油污染過的土壤中細(xì)菌，步驟③是利用添加石油擴(kuò)大培養(yǎng)分解石油的細(xì)菌，步驟③與步驟②中培養(yǎng)基成分的最大區(qū)別是步驟③的培養(yǎng)基中石油是唯一碳源。

（2）過程④是對(duì)分解石油的細(xì)菌進(jìn)行分離，分析B圖可知，分解石油的細(xì)菌在培養(yǎng)基表面分布較為均勻，說明同學(xué)甲進(jìn)行過程④的操作中接種方法是稀釋涂布平板法；圖B中培養(yǎng)基表面左側(cè)的菌落數(shù)目明顯比右側(cè)多，推測(cè)同學(xué)甲用此方法接種時(shí)出現(xiàn)圖B結(jié)果可能的操作失誤是接種時(shí)涂布不均勻；在接種前需隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。

（3）同學(xué)乙也按照同學(xué)甲的接種方法進(jìn)行了過程④的操作：將1mL樣品稀釋100倍，在3個(gè)平板上分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為56、58和57。據(jù)此可得出每升樣品中的活菌數(shù)為（56+58+57）30.1x100x1000=5.7×107。

（4）步驟⑤需要震蕩培養(yǎng)其目的是提高培養(yǎng)液溶氧量，同時(shí)使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用率。

（5）步驟⑤后取樣測(cè)定石油含量的目的是篩選出分解石油能力最好的細(xì)菌，其中石油剩余量最少的一組所含的細(xì)菌就是分解石油能力最好的細(xì)菌。