【題目】為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶,研究人員從某種海洋細菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656個堿基對),利用基因工程大量制備α-淀粉酶,實驗流程見下圖。請回答下列問題:
(1)獲取α-淀粉酶基因后,對其進行克隆常采用的技術是_________。
(2)為了便于擴增的DNA片段與表達載體連接,需在引物的_______端(填5’或3’)加上限制性酶切位點,且常在兩條引物上設計加入不同的限制性酶切位點,主要目的是_______________
(3)進行擴增時,反應的溫度和時間需根據(jù)具體情況進行設定,下列選項中________的設定與引物有關,________的設定與擴增片段的長度有關。(填序號)
①變性溫度 ②退火溫度 ③延伸溫度 ④變性時間 ⑤退火時間 ⑥延伸時間
(4)下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列:
圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含______個密碼子,如虛線框后的序列未知,預測虛線框后的第一個密碼子最多有_______ 種。
(5)獲得工程菌表達的α-淀粉酶后,為探究影響酶活性的因素,以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測定酶活性,結果如下:
緩沖液 | 50 mmol/L Na2HPO4-KH2PO4 | 50 mmol/L Tris-HCl | 50 mmol/L Gly-NaOH | ||||||||||
pH | 6.0 | 6.5 | 7.0 | 7.5 | 7.5 | 8.0 | 8.5 | 9.0 | 9.0 | 9.5 | 10.0 | 10.5 | |
酶相對活性% | 25.4 | 40.2 | 49.8 | 63.2 | 70.1 | 95.5 | 99.5 | 85.3 | 68.1 | 63.7 | 41.5 | 20.8 | |
根據(jù)上述實驗結果,初步判斷該α-淀粉酶活性最高的條件為_________________________ 。
【答案】PCR 5’ 使DNA片段能定向插入表達載體,并減少自連 ② ⑥ 8 13 pH為8.5,緩沖液為50 mmol/L Tris-HCl
【解析】
圖示為基因工程操作過程:①目的基因(α-淀粉酶基因)和表達載體的制備,②目的基因和表達載體構成重組DNA分子,③重組DNA分子導入受體細胞,④目的基因的篩選和鑒定。
(1)PCR是常用的體外擴增技術,能將微量的α-淀粉酶基因大幅增加。
(2)因延伸是在引物的3’端進行,因此需要在5’端加上限制性酶切位點,為使DNA片段能定向插入表達載體,并減少自連,通常需要在兩條引物上設計加入不同的限制性酶切位點。
(3)進行擴增時,②退火溫度促進引物與該模板DNA單鏈重新配對,⑥延伸時間與擴增片段的長度有關。
(4)mRNA分子三個相鄰的堿基稱為一個密碼子,虛線框內(nèi)mRNA片段包含24個堿基,8個密碼子,線框后的第一個堿基是U,第二、三位的堿基都有4種可能性,因此共有44=16種密碼子,因不可能是3種終止密碼子,虛線框后的第一個密碼子最多有16-3=13種。
(5)依圖可知:在pH為8.5,緩沖液為50 mmol/L Tris-HCl的條件下,α-淀粉酶相對活性最高。
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【題目】如圖是某核苷酸(圖1)與核苷酸鏈(圖2)示意圖,據(jù)圖回答下列問題:
(1)圖1的化合物名稱是_________________,是組成______________的基本單位之一。
(2)圖2中3的名稱是____________。
(3)此結構中的核酸與另一種核酸相比較,其特有的堿基的中文名稱是______________。
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【題目】下列生理活動具有雙向性的有幾項()
①生長素在胚芽鞘的極性運輸
②細胞發(fā)生質(zhì)壁分離時水分子的運輸
③膝跳反射時興奮在神經(jīng)纖維上的傳導
④活細胞中ATP與ADP間的轉化
⑤草原生態(tài)系統(tǒng)中狼和兔子間的信息傳遞
⑥人體內(nèi)非必需氨基酸和必需氨基酸間的轉換
⑦肝細胞內(nèi)葡萄糖和糖原的轉化
⑧C元素在生物群落與無機環(huán)境之間的轉換
A.四項B.五項C.六項D.七項
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【題目】關于“檢測花生子葉中是否含有脂肪”的實驗,敘述錯誤的是( )
A.選用的染液是蘇丹Ⅲ染液
B.脂肪粒會被染成橘黃色
C.實驗中不需要用顯微鏡觀察
D.要用50%鹽酸洗去標本上的浮色
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【題目】某種植物的花色有紫色、白色兩種。為探究該植物花色的遺傳規(guī)律,某生物興趣小組用該植物的純種進行雜交實驗,實驗結果如下:
對此實驗結果,興趣小組內(nèi)進行了討論和交流,對該植物的花色遺傳最后得出了如下解釋:
①由一對基因(A、a)控制的,但含a的雄配子(花粉)部分不育;
②由多對基因共同控制的(A、a,B、b,C、c……)。
(1)如果假設①正確,上述實驗F1紫花植株產(chǎn)生的可育雄配子中a配子的概率是________。
(2)為驗證上述假設,該小組一致同意對F1進行測交實驗,請預測兩種假設的實驗結果:
假設①:(F1♀)___________,(F1♂)___________。
假設②:(F1♀)___________,(F1♂)___________。
如果實驗證明假設②是正確的,則上述實驗F2中的紫花植株中純種占__________。
(3)有同學認為還有其他的假設可以解釋上述現(xiàn)象,請?zhí)岢龅谌N假設并作簡單的合理解釋:_______。
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【題目】吞噬細胞和淋巴細胞都屬于免疫細胞,下圖是它們間相互作用的部分模式圖,相關敘述正確的是
A. 物質(zhì)Ⅰ具有促進細胞D增殖分化的作用
B. 物質(zhì)Ⅰ和物質(zhì)Ⅱ都屬于免疫活性物質(zhì)
C. 細胞A能夠對病毒進行特異性識別
D. 細胞B和C在體液免疫和細胞免疫中都發(fā)揮作用
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【題目】下列關于植物激素的敘述,錯誤的是
A.乙烯能促進果實成熟B.細胞分裂素存在于植物體任何部位
C.脫落酸能抑制細胞分裂D.高濃度生長素類似物能抑制雜草生長
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【題目】如圖為某胰島素分子及其局部放大示意圖(其中的-S-S-是由2個-SH脫去2個H形成的),已知該胰島素由51個氨基酸分子組成。請回答下列問題:
(1)組成胰島素的氨基酸的結構通式是________________。
(2)若將一個胰島素分子完全水解成氨基酸,則需要消耗________個水分子。圖中放大的β鏈的局部結構匯總,含________種氨基酸,圖中屬于肽鍵的是________ (填數(shù)字)。
(3)據(jù)圖可知,一個胰島素分子中至少含有________個游離的氨基和________個游離的羧基。
(4)若組成胰島素的氨基酸的平均相對分子質(zhì)量為120,則胰島素的相對分子質(zhì)量為______。
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【題目】圖1是分泌蛋白合成、加工和分泌過程示意圖,其中a、b、c、d表示細胞器。圖2表示三種動物細胞器中的有機物含量;卮鹣铝袉栴}:
(1)圖1中的a是圖2中的 _________________ ,d是圖2中的 _________________________。b有糙面和光面兩種,其中光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是__________________的合成“車間”。
(2)物質(zhì)X是__________________ 。研究圖1所示過程的常用方法是 ______________。
(3)若圖2表示菠菜葉肉細胞中的幾種細胞器,則甲還可以表示 ____________________ 。
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