Question

【題目】PCR技術(shù)是將某一特定DNA片段在體外酶的作用下，復(fù)制出許許多多相同片段的一種方法，利用它能快速而特異地?cái)U(kuò)增任何要求的目的基因或DNA分子片段。它的基本過(guò)程如下：

注：圖中“▄”表示每次擴(kuò)增過(guò)程中需要的引物(用P代表)。每個(gè)引物含20個(gè)脫氧核苷酸，并分別與DNA片段兩端堿基互補(bǔ)，其作用是引導(dǎo)合成DNA子鏈。

請(qǐng)據(jù)圖分析回答：

（1）PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)_______________的過(guò)程。

（2）PCR擴(kuò)增過(guò)程中對(duì)DNA片段進(jìn)行高溫加熱處理，其目的是_________________，其作用相當(dāng)于細(xì)胞內(nèi)________酶的作用。

（3）在③適溫延伸過(guò)程中，必須加一特定的DNA聚合酶，從圖示中可判斷，該酶與一般人體細(xì)胞中的DNA聚合酶相比，最主要的特點(diǎn)是__________________。

（4）假如引物都用3H標(biāo)記，從理論上計(jì)算，DNA片段經(jīng)3次擴(kuò)增所得的8個(gè)DNA分子中，含有3H 標(biāo)記的DNA分子占________%。

（5）假定DNA片段含200對(duì)脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴(kuò)增，從理論上計(jì)算，除需要引物14個(gè)外，還需要游離的脫氧核苷酸________個(gè)。

Answer 1

【答案】DNA復(fù)制 使DNA雙鏈解開(kāi)成為單鏈 解旋 耐高溫 100 2520

【解析】

PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)DNA分子復(fù)制的過(guò)程，利用DNA分子熱變形原理，通過(guò)控制溫度控制控制DNA分子的解聚和結(jié)合，DNA分子體內(nèi)復(fù)制過(guò)程DNA的解旋是在解旋酶的作用下實(shí)現(xiàn)的；PCR擴(kuò)增DNA片段過(guò)程最高經(jīng)過(guò)n次擴(kuò)增，形成的DNA分子數(shù)是2n個(gè)，其中只有2條單鏈不含有引物。

（1）PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)DNA分子復(fù)制的過(guò)程。

（2）PCR擴(kuò)增過(guò)程中通過(guò)95℃高溫處理，使DNA雙鏈解開(kāi)成為單鏈，形成單鏈DNA分子；在生物體內(nèi)DNA分子解旋形成單鏈?zhǔn)窃诮庑�酶的作用下完成的�?/span>

（3）圖示中看出該DNA聚合酶在65-75℃發(fā)揮功能，與一般人體細(xì)胞中的DNA聚合酶相比，最主要的特點(diǎn)是耐高溫。

（4）經(jīng)3次擴(kuò)增，形成了8個(gè)DNA分子，其中只有兩條DNA單鏈上沒(méi)有引物，且兩條這兩條單鏈不在同一個(gè)DNA分子中，故含有3H 標(biāo)記的DNA分子占100%。

（5）DNA片段含200對(duì)脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴(kuò)增，形成了8個(gè)DNA分子，其中只有兩條DNA單鏈上沒(méi)有引物，因此該過(guò)程中需要的游離的脫氧核糖核苷酸數(shù)是200×2×（8-1）-14×20=2520個(gè)。