Question

【題目】飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動物吸收利用，還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用。若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等。以下是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖。請分析作答。

（1）培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，還應含有________、________、水、無機鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)。

（2）為防止雜菌污染，要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進行____________________，而且須將接種后的培養(yǎng)皿呈________狀態(tài)放置。

（3）接種以前進行的一系列操作，目的是在培養(yǎng)皿表面形成________。根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的________就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)。

（4）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁。產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶。實驗結果顯示A～E五種菌株中，________是產(chǎn)植酸酶的最理想菌株。

（5）以上方法對產(chǎn)生植酸酶的微生物進行了初步篩選，還需要進行____________的實驗。

Answer 1

【答案】碳源 氮源 （高壓蒸汽）滅菌 倒置 單個菌落（不答單個不給分） 菌落數(shù) E 發(fā)酵產(chǎn)植酸酶

【解析】

1、稀釋平板法在培養(yǎng)基上分離、培養(yǎng)出微生物的單個菌落，以便于計數(shù)、移植、分離，從而達到純培養(yǎng)的目的。

2、選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長。由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁。產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶。

3.菌落：是指由單個微生物細胞或一堆同種細胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長繁殖到一定程度，形成以母細胞為中心的一團肉眼可見的、有一定形態(tài)、構造等特征的子細胞集團。各種微生物在一定條件下形成的菌落特征，如大小、形狀、邊緣、表面、質(zhì)地、顏色等，具有一定的穩(wěn)定性，是衡量菌種純度、辨認和鑒定菌種的重要依據(jù)。

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分一般包括水、無機鹽、碳源、氮源四類。因此，該培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，還應含有碳源、氮源、水、無機鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)。

（2）為防止雜菌污染培養(yǎng)物，應對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行高壓蒸汽滅菌法滅菌處理，接種微生物后培養(yǎng)皿要呈倒置狀態(tài)放置，這樣可以防止水珠滴落到培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)物。

（3）接種前進行的一系列操作都是為了在培養(yǎng)皿表面形成單個菌落。然后根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)。

（4）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁。產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶。分析題圖可以知道，菌落E周圍的透明圈最大，所以菌落E是產(chǎn)植酸酶的理想菌株。

（5）通過以上方法對產(chǎn)生植酸酶的微生物進行了初步篩選，還需要進行發(fā)酵產(chǎn)植酸酶的實驗進一步鑒定。