（18分） pBR322質(zhì)粒是基因工程中經(jīng)常選用的工具，如圖Ⅰ所示。

I．目的基因如果插入質(zhì)粒的某抗性基因中，將使該基因失活。為了檢查運載體是否導入原本無Ampr 和Tetr的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖Ⅱ的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖Ⅲ的結(jié)果（空圈表示與Ⅱ?qū)φ諢o菌落的位置）。

（1）．pBR322質(zhì)粒在基因工程中的作用是             。

（2）．下圖是pBR322質(zhì)粒上被某種酶識別的一段特定序列。a處被切割后，產(chǎn)生的暴露出來的單鏈堿基序列是                                        。如果要從生物細胞中分離目的基因，首先需要進行基因定位，然后再用上述酶切割。將目的基因與質(zhì)粒連接起來的酶作用于圖中的        處。

（3）與圖Ⅲ空圈相對應的圖Ⅱ中的菌落表現(xiàn)型是                              ，由此說明目的基因插入了        中。

II．下面是pBR322質(zhì)粒的部分堿基序列，所編碼蛋白質(zhì)的氨基酸序列為“甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—纈氨酸…”（甲硫氨酸的密碼子AUG也是起始密碼子）。

  

則：①、②兩單鏈作為轉(zhuǎn)錄模板鏈的是      （填序號），該鏈轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA順序是AUG                                                 ；如圖中箭頭所指堿基對G/C缺失，該基因相應片段編碼的氨基酸序列為                                      

                                                                     （ 4分）。

 

【答案】

（18分，每空2分）I．（1）作為運載體         （2）．  －TGCA或ACGT－      a

（3）．    能抗氨芐青霉素，但不能抗四環(huán)素      Tetr

II．② CGGGAGGCGGAUGUC……  甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—精氨酸—甲硫氨酸…4分

【解析】略

 

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源： 題型：

目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。

（1）建構(gòu)基因表達載體時，必須有               、復制原點、目的基因、終止子以及                                    。

（2）構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因，以便于                    。

（3）pBR322分子中有單個EcoRI限制酶作用位點，EcoRl只能識別序列—GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoRl的切點，請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRI切割后所形成的黏性末端                   。

（4）pBR322分子中另有單個的BamHI限制酶作用位點，現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連接酶作用恢復         ，成功獲得了重組質(zhì)粒。說明                         。

（5）為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導入原本無ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落；再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果（空圈表示與圖二對照無菌落的位置）。與圖三空圈相對應的圖二中的菌落表現(xiàn)型是            。圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導入的是                 。

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科目：高中生物 來源：2011-2012學年海南省洋浦中學高二下學期期中考試生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

目前所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖所示。

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因，以便于                              。
(2)pBR322分子中有單個EcoR I限制酶作用位點，EcoR 1只能識別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoR I的切點，請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。
                                                                      
(3)pBR322分子中另有單個的BamHI限制酶作用位點，現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連接酶作用恢復___    ___ 鍵，成功的獲得了重組質(zhì)粒。
(4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導入原本無ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應的圖二中的菌落表現(xiàn)型是___      _____ ，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導入的是___           __。

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科目：高中生物 來源：2012屆甘肅省蘭州一中高三9月份月考生物試卷 題型：綜合題

（18分）pBR322質(zhì)粒是基因工程中經(jīng)常選用的工具，如圖Ⅰ所示。

I．目的基因如果插入質(zhì)粒的某抗性基因中，將使該基因失活。為了檢查運載體是否導入原本無Ampr和Tetr的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖Ⅱ的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖Ⅲ的結(jié)果（空圈表示與Ⅱ?qū)φ諢o菌落的位置）。
（1）．pBR322質(zhì)粒在基因工程中的作用是            。
（2）．下圖是pBR322質(zhì)粒上被某種酶識別的一段特定序列。a處被切割后，產(chǎn)生的暴露出來的單鏈堿基序列是                                       。如果要從生物細胞中分離目的基因，首先需要進行基因定位，然后再用上述酶切割。將目的基因與質(zhì)粒連接起來的酶作用于圖中的       處。
（3）與圖Ⅲ空圈相對應的圖Ⅱ中的菌落表現(xiàn)型是                             ，由此說明目的基因插入了       中。
II．下面是pBR322質(zhì)粒的部分堿基序列，所編碼蛋白質(zhì)的氨基酸序列為“甲硫氨酸—精氨酸—谷氨酸—丙氨酸—天冬氨酸—纈氨酸…”（甲硫氨酸的密碼子AUG也是起始密碼子）。

則：①、②兩單鏈作為轉(zhuǎn)錄模板鏈的是     （填序號），該鏈轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的mRNA順序是AUG                                                 ；如圖中箭頭所指堿基對G/C缺失，該基因相應片段編碼的氨基酸序列為                                      
                                                                    （ 4分）。

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科目：高中生物 來源：2012屆山西省太原五中高三上學期9月份月考生物試卷 題型：綜合題

（11分）目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因，以便于________。觀察上圖，如果A為質(zhì)粒，則C表示       。
(2)pBR322分子中有單個EcoRⅠ限制酶作用位點，EcoRⅠ只能識別序列—GAATTC—，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoRⅠ的切點，請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。
_______________________________________________________________________
(3)pBR322分子中另有單個的BamHⅠ限制酶作用位點，現(xiàn)將經(jīng)BamHⅠ處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因，通過____________作用恢復________________________鍵，成功地獲得了重組質(zhì)粒。能形成重組質(zhì)粒的原因是_______________________________________________________________________
(4) 作為受體大腸桿菌應不含_______________________，以方便篩選已導入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應的圖二中的菌落表現(xiàn)型是_______，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導入的是______________。
（5）基因工程中使用的限制酶，其特點是_______________________，下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識別，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。

將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質(zhì)粒X－1混合連接，連接后獲得的質(zhì)粒類型有＿＿＿。（可多選）

A．X－1B．X－2C．X－3D．X－4

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科目：高中生物 來源：2011-2012學年山西省高三上學期9月份月考生物試卷 題型：綜合題

（11分）目前基因工程所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細菌質(zhì)粒的各種元件為基礎重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖一所示。

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時要有抗性基因，以便于________。觀察上圖，如果A為質(zhì)粒，則C表示        。

(2)pBR322分子中有單個EcoRⅠ限制酶作用位點，EcoRⅠ只能識別序列—GAATTC—，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個EcoRⅠ的切點，請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。

_______________________________________________________________________

(3)pBR322分子中另有單個的BamHⅠ限制酶作用位點，現(xiàn)將經(jīng)BamHⅠ處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BglⅡ處理得到的目的基因，通過____________作用恢復________________________鍵，成功地獲得了重組質(zhì)粒。能形成重組質(zhì)粒的原因是_______________________________________________________________________

 (4) 作為受體大腸桿菌應不含_______________________，以方便篩選已導入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對照無菌落的位置)。與圖三空圈相對應的圖二中的菌落表現(xiàn)型是_______，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導入的是______________。

（5）基因工程中使用的限制酶，其特點是_______________________，下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識別，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。

 

將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質(zhì)粒X－1混合連接，連接后獲得的質(zhì)粒類型有＿＿＿。（可多選）A．X－1  B．X－2   C．X－3   D．X－4

 

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