Question

【題目】已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。將這兩種細胞在培養(yǎng)皿中混合，加促融劑促進細胞融合，獲得雜種細胞，并生產(chǎn)單克隆抗體。請回答下列有關(guān)問題：

（1）生產(chǎn)單克隆抗體時，一般不直接利用B淋巴細胞，主要原因是____________________________________________________________________。

（2）①過程中，常用的與植物細胞融合相同的誘導(dǎo)劑是__________。

（3）②過程為________培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體物質(zhì)，其中通入CO2的目的是__________________________________________________________________。

（4）④表示雜交瘤細胞的擴大培養(yǎng)，其既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠________內(nèi)培養(yǎng)，體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點是____________________。

（5）為了從培養(yǎng)液中分離出雜交瘤細胞，需要③過程向培養(yǎng)液中加入_____________，理由是雜交瘤細胞可利用__________________途徑合成DNA，從而才能在該培養(yǎng)液中增殖。

Answer 1

【答案】B淋巴細胞不能無限增殖 聚乙二醇 細胞 維持培養(yǎng)液的pH 腹腔 無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便 氨基嘌呤 淋巴細胞中的S

【解析】

1、人淋巴細胞、鼠骨髓瘤細胞發(fā)生融合后，培養(yǎng)皿中有3中融合細胞（人淋巴細胞與人淋巴細胞融合細胞、鼠骨髓瘤細胞與鼠骨髓瘤細胞融合細胞、雜交瘤細胞）和人淋巴細胞、鼠骨髓瘤細胞。

2、鼠骨髓瘤細胞、鼠骨髓瘤細胞與鼠骨髓瘤細胞融合細胞中只有D途徑，雜交瘤細胞中有D和S兩條途徑。

（1）生產(chǎn)單克隆抗體時，一般不直接利用B淋巴細胞，主要原因是B淋巴細胞屬于高度分化的細胞，不能無限增殖。

（2）植物細胞常采用電刺激、聚乙二醇等手段進行融合，而動物細胞采用電刺激、聚乙二醇、仙臺病毒等手段進行融合。因此，①過程中常用的與植物細胞融合相同的誘導(dǎo)劑是聚乙二醇。

（3）②過程為細胞培養(yǎng)，培養(yǎng)液中還需通入氣體物質(zhì)，其中通入氧氣維持細胞呼吸，通入CO2維持培養(yǎng)液的pH。

（4）雜交瘤細胞既可在體外培養(yǎng)，也可注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)。體內(nèi)培養(yǎng)與體外培養(yǎng)相比，其優(yōu)點是無需再提供營養(yǎng)物質(zhì)以及無菌環(huán)境，操作簡便。

（5）人淋巴細胞、鼠骨髓瘤細胞在培養(yǎng)皿中混合，加聚乙二醇促進細胞融合，培養(yǎng)液中的細胞有以下5種：人淋巴細胞、鼠骨髓瘤細胞、人淋巴細胞與人淋巴細胞融合細胞、鼠骨髓瘤細胞與鼠骨髓瘤細胞融合細胞以及雜交瘤細胞。其中，人淋巴細胞、人淋巴細胞與人淋巴細胞融合細胞不能無限繁殖，不久會衰老、死亡。向培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，氨基嘌呤可阻斷D途徑，只有D途徑的鼠骨髓瘤細胞、鼠骨髓瘤細胞與鼠骨髓瘤細胞融合細胞無法增殖，而雜交瘤細胞可利用S途徑合成DNA，繼續(xù)繁殖，從而分離出雜交瘤細胞。