番茄果實(shí)成熟時(shí),多聚半乳糖苷酶(PG)的合成逐漸增加,其作用是分解果膠,使果實(shí)軟化,這個(gè)過程迅速難以控制,常常導(dǎo)致過熟、腐爛。反義RNA技術(shù)(如下圖),可以有效地解決這一難題,該技術(shù)的核心是,讓轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞的目的基因(反義基因)轉(zhuǎn)錄與細(xì)胞原有mRNA(靶RNA)互補(bǔ)的反義RNA,從而形成雙鏈RNA,阻止人們不希望的酶蛋白質(zhì)的合成。請(qǐng)分析回答:
(1)這樣合成的反義基因分子與番茄細(xì)胞中原來控制PG合成的基因相比,主要特點(diǎn)是:
。
(2)若合成的反義基因分子第一條鏈中A+T=45%,以它為模板合成的完整反義雙鏈基因中C+G= 。將該反義基因分子用15N充分標(biāo)記后,轉(zhuǎn)移到14N的培養(yǎng)基中復(fù)制n次,所得全部反義基因分子中含15N的比例為 。
(3)如果指導(dǎo)番茄合成PG的mRNA的堿基序列是——AUCCAGGUC——,那么,PG反義基因的這段堿基序列是 。
(4)番茄的花色表現(xiàn)為白色(只含白色素)和黃色(含黃色錦葵色素)一對(duì)相對(duì)性狀,由兩對(duì)等位基因(A和a,B和b)共同控制,顯性基因A控制以白色素為前體物合成黃色錦葵色素的代謝過程,但當(dāng)顯性基因B存在時(shí)即抑制其表達(dá)(生化機(jī)制如下圖所示)。據(jù)此回答:
①本圖解說明基因是通過控制 來控制生物性狀的。
②開黃花的番茄植株的基因型是 ,開白花的純種植株的基因型是 。
③某育種單位欲利用開白花的純種植株培育出能穩(wěn)定遺傳的黃色新品種,他們應(yīng)該選擇基因型為 的兩個(gè)品種進(jìn)行雜交,得到F1種子。
方案一:將F1種子種下得F1植株,F(xiàn)1自交得F2種子;F2種子種下得F2植株,在F2植株中開黃花和白花之比為 ,選擇開黃花的植株自交得F3種子,F(xiàn)3種子并不都符合育種要求,原因是F3種子中黃色純合只占 ,F(xiàn)3植株開黃色的占 。若要得到黃色純合種子接下來應(yīng)該怎樣操作? 。
方法二:將F1種子種下得F1植株,取F1植株產(chǎn)生的 ,能夠在最短的時(shí)間里培育出黃花純種。
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科目:高中生物 來源: 題型:
多聚半乳糖醛酸酶(PG)能降解果膠使細(xì)胞壁破損。番茄果實(shí)成熟中,PG合成顯著增加,能使果實(shí)變紅變軟,但不利于保鮮。利用基因工程的方法減少PG基因的表達(dá),可延長(zhǎng)果實(shí)保質(zhì)期。科學(xué)家將PG基因反向接到Ti質(zhì)粒上,導(dǎo)入到番茄細(xì)胞中,得到轉(zhuǎn)基因番茄。請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1) 提取目的基因時(shí),若已獲取PG的mRNA,可通過________獲取PG基因。在該基因上游加結(jié)構(gòu)A可確;虻姆聪蜣D(zhuǎn)錄,結(jié)構(gòu)A上應(yīng)具有________結(jié)合位點(diǎn)。得到的目的基因兩側(cè)需人工合成黏性末端。已知BamH Ⅰ酶的識(shí)別序列如圖甲所示,請(qǐng)?jiān)趫D乙的相應(yīng)位置上,畫出目的基因兩側(cè)的黏性末端。
(2) 重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中的目的是__________________________________。
(3) 用含目的基因的農(nóng)桿菌感染番茄原生質(zhì)體后,可用含有________的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,與此同時(shí),為能更好地達(dá)到培養(yǎng)目的,培養(yǎng)基中除加入必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,還需加入________。
(4) 由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄反義RNA,且能與____________互補(bǔ)結(jié)合,抑制PG基因的正常表達(dá)。若轉(zhuǎn)基因番茄的保質(zhì)期比非轉(zhuǎn)基因番茄的________,則可確定轉(zhuǎn)基因番茄獲得成功。
(5) 獲得的轉(zhuǎn)基因番茄產(chǎn)生的種子不一定保留目的基因,科研人員常采用________方法使子代保持轉(zhuǎn)基因的優(yōu)良性狀。
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科目:高中生物 來源: 題型:
6.(12分)多聚半乳糖醛酸酶(PG),能降解果膠使細(xì)胞壁破損。番茄果實(shí)成熟中,PG合成顯著增加,能使果實(shí)交紅變軟,但不利于保鮮,可利用基因工程的方法以其進(jìn)行改造。請(qǐng)據(jù)圖l回答:
提取目的基因
①若已獲取PG的mRNA,可通過______獲取PG基因。
②在該基因上游加結(jié)構(gòu)A可確保基因的反義轉(zhuǎn)錄,結(jié)構(gòu)A上應(yīng)具有________酶結(jié)合位點(diǎn)。得到的目的基因兩側(cè)需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的識(shí)別序列如圖2-甲所示,請(qǐng)?jiān)趫D2-乙相應(yīng)位置上,畫出目的基因兩側(cè)的黏性末端。
③重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到大腸桿菌中的目的是_____________________________________.
(2)用含目的基因的農(nóng)稈菌感染番茄原生質(zhì)體后,可用培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。培養(yǎng)24-48h后取樣,在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為25%的蔗糖溶液中,觀察細(xì)胞__________現(xiàn)象來鑒別細(xì)胞壁是否再生。
(3)由于導(dǎo)入的目的基因能轉(zhuǎn)錄反義RNA,且能與_____________互補(bǔ)結(jié)合,抑制PG基因的正常表達(dá)。若轉(zhuǎn)基因番茄的保質(zhì)期比非轉(zhuǎn)基因番茄__________,則可確定轉(zhuǎn)基因番茄成功。
(4)獲得的轉(zhuǎn)基因番茄產(chǎn)生的種子不一定保留目的基因,科研人員常采用__________技術(shù)手段使子代保持轉(zhuǎn)基因的優(yōu)良性狀。
(5)改造過程需要的工具酶有_______________,如果在此過程中形成的是平末端,則起“縫合作用的酶是_________________________.
(6)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),除了插入目的基因外,基因表達(dá)載體中還需含有___________,在該番茄薪品種的培育過程中,將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法叫做___________。
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