Question

科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點，下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖（ampr為抗氨芐青霉素基因），其中①—④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟，Ⅰ、Ⅱ表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細胞。請據(jù)圖作答：

（1）在構(gòu)建基因表達載體時，可用一種或者多種限制酶進行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，在此實例中，應該選用限制酶                  分別對            進行切割，切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為             種。
（2）培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長，要利用該培養(yǎng)基篩選已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞，應使基因表達載體Ⅰ中含有           作為標記基因。
（3）研究人員通常采用        法將魚抗凍蛋白基因?qū)�入番茄細胞�?nèi)。通常采用      技術(shù)，在分子水平檢測目的基因是否翻譯形成了相應的蛋白質(zhì)。
（4）利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄組織細胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細胞的               過程。

Answer 1

（1）  含PstⅠ、SmaⅠ魚抗凍蛋白基因的DNA、質(zhì)粒（2分）4、2（2分）
（2）抗氨節(jié)青霉素基因（ampr）
（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化（或基因槍法等，答案合理即給分）抗原—抗體雜交
（4）脫分化、再分化

解析