Question

【題目】金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾病。金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色。圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答相關(guān)問題：

（1）按細(xì)胞結(jié)構(gòu)分類，金黃色葡萄球菌屬于________生物，從培養(yǎng)過程分析，金黃色葡萄球菌可進(jìn)行________呼吸。

（2）7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分包括________________，用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)的主要目的是____________________________。

（3）操作中在血平板上的接種方法是________，接種操作前后需要對接種工具進(jìn)行________滅菌。

（4）在制備血平板時(shí)需將pH調(diào)節(jié)至________（填“微酸性”或“微堿性”）后滅菌，待培養(yǎng)基________后，再加入適量血液。按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于________培養(yǎng)基。

（5）經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)________的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應(yīng)商仍認(rèn)為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進(jìn)行完善，完善的方案是________________________________。

Answer 1

【答案】（1）原核 有氧 （2）碳源、氮源、水和無機(jī)鹽 增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量

（3）平板劃線法 灼燒 （4）微堿性 冷卻 鑒別

（5）周圍存在透明圈 設(shè)置不加鮮牛奶其他操作均相同的對照組

【解析】

試題微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及生長因子。培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）；②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）。在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí)，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。

（1）如何判斷細(xì)菌：帶“菌”字的生物中，“菌”字前有“桿”“球”“弧”“螺旋”等表示形態(tài)的字的都是細(xì)菌，如大腸桿菌、肺炎雙球菌、葡萄球菌、霍亂弧菌等都是細(xì)菌，葡萄球菌屬于細(xì)菌，屬于原核生物；在培養(yǎng)的過程中由于沒有密閉培養(yǎng)，所以葡萄球菌屬于有氧呼吸的菌種。

（2）7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基中含有蛋白質(zhì)，所以可以提供氮源和碳源，又含有水分和氯化鈉，所以提供的營養(yǎng)物質(zhì)為碳源、氮源、水和無機(jī)鹽；高濃度的鹽溶液可以對微生物進(jìn)行選擇，而葡萄球菌可以生存在高濃度的鹽溶液中。

（3）題圖中的接種過程使用接種環(huán)進(jìn)行接種，此接種方法是平板劃線法；操作前后對接種環(huán)的滅菌方式是灼燒滅菌。

（4）血液是微堿性的，為維持紅細(xì)胞的正常形態(tài)，在制備血平板時(shí)需將pH調(diào)節(jié)至微堿性后滅菌，為防止高溫破壞血細(xì)胞，滅菌后的培養(yǎng)基應(yīng)在冷卻后，再加入適量血液；由于該培養(yǎng)基能夠鑒別是否含有葡萄球菌，所以屬于鑒別培養(yǎng)基。

（5）由題干“金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色”，所以如果經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)透明圈的菌落，說明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌；要進(jìn)一步證明金黃色葡萄球菌來自鮮牛奶，需要對本實(shí)驗(yàn)進(jìn)行完善，即需要設(shè)計(jì)對照實(shí)驗(yàn)，對照組實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)是在培養(yǎng)基中不加鮮牛奶而其它操作均相同。