Question

【題目】人的HPRT基因缺陷（HPRT-）和小鼠的TK基因缺陷（TK－）細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中都不能存活。雜種細(xì)胞在分裂中隨機(jī)丟失人的染色體，但保留所有的鼠染色體。因此，利用人—鼠細(xì)胞融合技術(shù)可以將人類基因定位于特定的染色體上。

（1）將人的HPRT－細(xì)胞與小鼠的TK－細(xì)胞用________促進(jìn)融合，融合后形成的具有原來兩個或多個細(xì)胞遺傳信息的_______細(xì)胞，稱為雜交細(xì)胞。然后培養(yǎng)在________培養(yǎng)基（HAT）中，最終篩選出人—鼠雜種細(xì)胞。細(xì)胞融合技術(shù)突破了有性雜交方法的局限，使____________成為可能。

（2）將存活下來的雜種細(xì)胞進(jìn)行單克隆培養(yǎng)，獲得不同的細(xì)胞株，用堿性染料染色后鏡檢，觀察結(jié)果如下：

細(xì)胞株編號	1	2	3	4	5	6
所含人染色體編號	11，14， 17，22	7，11， 14，17	5， 7， 17，21	2， 9， 11，17	5，17， 18，20	2， 5， 17，19

由此可推測________基因在________染色體上。

（3）如果要確定人鳥苷酸（UMP）激酶基因所在染色體，應(yīng)選擇UMP激酶缺陷的________（填“人”或“鼠”）細(xì)胞與相應(yīng)細(xì)胞雜交，這樣的方法________（填“能”或“不能”）對小鼠的基因進(jìn)行定位。

（4）經(jīng)過基因測序發(fā)現(xiàn)UMP激酶缺陷是因?yàn)榫幋a它的基因中部的部分堿基替換造成的，結(jié)果可能導(dǎo)致（_____）

A.轉(zhuǎn)錄不能進(jìn)行

B.合成的蛋白質(zhì)分子缺少部分氨基酸序列

C.合成的蛋白質(zhì)分子增加部分氨基酸序列

D.合成的蛋白質(zhì)分子氨基酸數(shù)目不變

Answer 1

【答案】 PEG（或滅活病毒） 單核 選擇 遠(yuǎn)緣雜交 TK 17 鼠 不能 BD

【解析】

根據(jù)題干信息已知，人的HPRT基因缺陷（HPRT-；TK+）和小鼠的TK基因缺陷（TK－；HPRT+）細(xì)胞在HAT培養(yǎng)基中都不能存活。據(jù)圖分析，將人的HPRT基因缺陷（HPRT-）和小鼠的TK基因缺陷（TK－）細(xì)胞融合，形成融合細(xì)胞（HPRT+；TK+），在HAT培養(yǎng)基上讓其生長和分裂。

（1）將人的HPRT-細(xì)胞與小鼠的TK-細(xì)胞用PEG（或滅活病毒）促進(jìn)融合，圖中顯示融合細(xì)胞的細(xì)胞核也發(fā)生了融合，形成了單核的融合細(xì)胞（雜交細(xì)胞）；然后培養(yǎng)在選擇培養(yǎng)基（HAT）中，最終篩選出人-鼠雜種細(xì)胞。細(xì)胞融合技術(shù)能夠突破有性雜交方法的局限，使得遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

（2）將存活下來的雜種細(xì)胞進(jìn)行單克隆培養(yǎng)，獲得不同的細(xì)胞株，用堿性染料（或龍膽紫或醋酸洋紅）染色后鏡檢。根據(jù)表格中的數(shù)據(jù)分析可知，所有的細(xì)胞株都含有17號染色體，據(jù)此推測TK基因應(yīng)該在17染色體上。

（3）如果要確定人鳥苷酸（UMP）激酶基因所在染色體，應(yīng)選擇UMP激酶缺陷的鼠細(xì)胞與相應(yīng)細(xì)胞雜交，這樣的方法不能對小鼠的基因進(jìn)行定位。

（4）經(jīng)過基因測序發(fā)現(xiàn)UMP激酶缺陷是因?yàn)榫幋a它的基因中部的部分堿基替換造成的，由于改變發(fā)生在基因的中部，因此不會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄不能發(fā)生，A錯誤；由于基因中部的部分堿基發(fā)生了替換，可能使得終止子提前，進(jìn)而導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)分子缺少部分氨基酸序列，B正確；堿基發(fā)生替換發(fā)生在中間，不會導(dǎo)致末端的終止子改變，因此蛋白質(zhì)的氨基酸序列不會增加，C錯誤；堿基替換后可能導(dǎo)致氨基酸的種類發(fā)生改變，而合成的蛋白質(zhì)分子氨基酸數(shù)目不變，D正確。