Question

【題目】細(xì)胞融合技術(shù)是細(xì)胞工程中的一門非常重要的技術(shù)，該技術(shù)能夠按照人的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品，作為科學(xué)研究的一種手段，在細(xì)胞工程中有著非常廣泛的應(yīng)用。據(jù)圖回答下列問題：

（1）若a、b表示番茄和馬鈴薯兩種植物的體細(xì)胞，ab細(xì)胞融合之前，要用到的酶是_____________，處理后得到____________。接著可用化學(xué)誘導(dǎo)劑____________誘導(dǎo)融合，融合成功的標(biāo)志是____________，這些融合細(xì)胞經(jīng)過脫分化形成____________。

（2）若a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和已免疫的B淋巴細(xì)胞。將其融合獲得 ____________（答出兩個特點）的d雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行____________培養(yǎng)和抗體檢測以后，再經(jīng)過多次篩選，可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。利用滅活的病毒可以誘導(dǎo)產(chǎn)生d細(xì)胞，其中的滅活是指________________________。

Answer 1

【答案】纖維素酶和果膠酶 原生質(zhì)體 PEG（聚乙二醇） 雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁 愈傷組織 既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖 克隆化 利用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)

【解析】

1、植物體細(xì)胞雜交過程：（1）表示制備原生質(zhì)體。去除細(xì)胞壁的方法：酶解法，即在溫和的條件下用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁；（2）誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合。方法為：物理法：離心、振動、電激，化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）；（3）雜種細(xì)胞的篩選。細(xì)胞融合形成雜種細(xì)胞，完成的標(biāo)志：再生出新的細(xì)胞壁；（4）雜種植株的培養(yǎng)和鑒定，過程包括脫分化和再分化過程。

2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

（1）若a、b是番茄和馬鈴薯兩種植物的體細(xì)胞植物，植物體細(xì)胞雜交前，先采用酶解法去除細(xì)胞壁，即采用纖維素酶、果膠酶處理除去細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體；誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）；原生質(zhì)體融合完成的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁。融合細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

（2）若利用動物細(xì)胞融合技術(shù)來生產(chǎn)單克隆抗體，應(yīng)將經(jīng)免疫的B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，僅考慮兩兩融合，則融合的細(xì)胞C有3種，融合后需經(jīng)多次篩選，以得到既能產(chǎn)特異性抗體、又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞d。該過程中第一次篩選一般利用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行，第二次篩選需對細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)的克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢驗，以便獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)或體外擴(kuò)大培養(yǎng)。誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有物理法（離心、振動、電激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒）�！皽缁睢笔侵咐�用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)。