Question

【題目】某公司在防疫期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果，研究人員檢測了凝膠洗手前后手部細(xì)菌的含量。凝膠洗手前的檢測流程見下圖。回答下列問題：

（1）在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前需要配制培養(yǎng)基。各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和________，若還要觀察細(xì)菌的菌落特征則培養(yǎng)基中通常還需要添加_________________。

（2）為統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌數(shù)量，應(yīng)選擇的接種方法是____________。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)一般就能得出接種液中的活菌數(shù)，其原理是：_____________________________________。

（3）培養(yǎng)一段時(shí)間后可根據(jù)菌落的_____________________（至少填兩項(xiàng)）等菌落特征初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型。為了計(jì)算洗手前手部單位面積的細(xì)菌數(shù)量，除圖中所示信息外還應(yīng)知道____________和_____________的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)信息。

（4）根據(jù)上圖所示步驟得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可信度低，為了提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度，請給出一點(diǎn)改進(jìn)建議__________________________________。

Answer 1

【答案】無機(jī)鹽 瓊脂 稀釋涂布平板法 當(dāng)稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落就來自于一個(gè)活菌 大小、形狀（隆起程度和顏色） 接種液的稀釋度 涂布液的體積 同一稀釋度下涂布多個(gè)平板，取平板菌落數(shù)的平均值或增設(shè)空白對照組，排除雜菌污染對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成的干擾

【解析】

微生物的研究通常包含微生物的獲得、分離純化、培養(yǎng)以及保存等。單菌落分離法包含劃線分離法和涂布分離法，常用于分離獲得單菌落。稀釋平板計(jì)數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落（即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成）進(jìn)行計(jì)數(shù)的接種方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。計(jì)數(shù)時(shí)，首先將待測樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個(gè)細(xì)胞存在（否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后，由單個(gè)細(xì)胞生長繁殖形成菌落，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計(jì)算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計(jì)數(shù)法。

（1）無機(jī)鹽對維持生命活動非常重要，各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。菌落在固體培養(yǎng)基上形成，若還要觀察細(xì)菌的菌落特征則培養(yǎng)基中通常還需要添加瓊脂（凝固劑）。

（2）稀釋涂布平板法可以對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，為統(tǒng)計(jì)洗手前手部細(xì)菌數(shù)量，應(yīng)選擇的接種方法是稀釋涂布平板法。當(dāng)稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面的一個(gè)菌落就來自于一個(gè)活菌，因此通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)一般就能得出接種液中的活菌數(shù)。

（3）培養(yǎng)一段時(shí)間后可根據(jù)菌落的大小、形狀（隆起程度和顏色）等菌落特征初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型。除圖中所示信息外還應(yīng)知道接種液的稀釋度和涂布液的體積的準(zhǔn)確數(shù)據(jù)信息，才能知道手部單位面積的細(xì)菌數(shù)量。

（4）上圖所示步驟得出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可信度低，為了提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度，同一稀釋度下涂布多個(gè)平板，取平板菌落數(shù)的平均值或增設(shè)空白對照組，排除雜菌污染對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成的干擾。