Question

家蠶細胞具有高效表達外源基因能力．將人干擾素基因導入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥．
①進行轉基因操作前，需用

 

酶短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
②為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的

 

和

 

之間．
③采用PCR技術可驗證干擾素基因是否已經導入家蠶細胞．PCR反應體系的主要成分應該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、

 

和

 

；在PCR反應過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用是

 

．
④利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以

 

增加培養(yǎng)的細胞數量，也有利于空氣交換．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：1、基因工程是指按照人類的愿望，將不同生物的遺傳物質在體外人工剪切并和載體重組后轉入細胞內進行擴增，并表達產生所需蛋白質的技術．基因表達載體的組成包括：目的基因、啟動子、終止子、標記基因和復制原點．
2、PCR是聚合酶鏈式反應的縮寫．PCR是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術．通過這一技術，可以獲取大量的目的基因．PCR擴增反應需要兩種引物、模板DNA、原料（4種脫氧核苷酸）、酶（耐高溫的DNA聚合酶）．

解答： 解：①進行轉基因操作前，需用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）短時處理幼蠶組織，以便獲得單個細胞．
②為使干擾素基因在家蠶細胞中高效表達，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達載體的啟動子和終止子之間．
③PCR反應體系的主要成分應該包含：擴增緩沖液（含Mg²⁺）、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、TaqDNA聚合酶和（對干擾素基因特異性的）DNA引物；在PCR反應過程中，有一個環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對較低的55℃左右，其作用是引物結合到互補DNA鏈上．
④利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時，貼壁生長的細胞會產生接觸抑制．通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中，這樣可以增大細胞貼壁生長的附著面積增加培養(yǎng)的細胞數量，也有利于空氣交換．
故答案為：
①胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）
②啟動子                  終止子
③TaqDNA聚合酶      （對干擾素基因特異性的）DNA引物     引物結合到互補DNA鏈上  
④增大細胞貼壁生長的附著面積

點評：本題考查基因工程的相關知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷能力．基因工程是考查的重點知識，與細胞工程、胚胎工程等現代生物技術都有一定聯系．復習時可以建立知識框架，幫助記憶和理解．