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【題目】脫落酸(ABA)有“逆境激素”之稱,在植物對抗干旱等不利環(huán)境因素時起重要作用。

(1)ABA對植物的生命活動起______作用,其合成經過細胞內復雜的生物化學反應過程,需要NCED1~NCED5等酶的______作用。

(2)研究人員對水稻進行干旱脅迫4h及復水4h處理,測定葉片中ABA含量及相關基因的mRNA含量,結果如圖1。

①由圖1中甲圖可知,干旱脅迫下,葉片ABA含量______,誘導葉片氣孔______,減少水分散失。

②NCED1~NCED5基因的表達具有組織特異性,如NCED4基因主要在根中表達。

僅根據(jù)圖1的結果,能否確認NCED4基因不是干旱脅迫的響應基因。請做出判斷并說明理由:______。

(3)研究人員將NCED3基因作為目的基因,正向連接構建表達載體導入水稻細胞,獲得轉基因幼苗Ⅰ,反向連接構建表達載體(轉錄NCED3基因的非模板鏈),獲得轉基因水稻幼苗Ⅱ。將兩種幼苗與野生型水稻幼苗一起培養(yǎng),干旱脅迫處理15天后,檢測植株相關生長指標及體內ABA含量,部分結果如下表和圖2。

水稻

幼苗

處理

每株地上部分

干重(g)

每株根干重(g)

野生型

正常灌溉

0.50

0.12

干旱脅迫

0.41

0.20

①據(jù)表中結果闡述干旱脅迫下野生型植株形態(tài)改變的生物學意義:______。

②圖2中1、2、3組ABA含量無明顯差異的原因是______

③綜合上述研究,分析第6組植株ABA含量低于第4組的原因是______

(4)干旱脅迫下,野生型植株和NCED3基因敲除突變體中NGA1蛋白含量均增加。研究人員推測NGA1蛋白是干旱環(huán)境促進NCED3基因表達的調控因子。檢測______植株的NCED3基因表達量,結果為實驗組低于對照組,初步支持上述推測。若要進一步驗證推測,應選擇的實驗材料、實驗組處理及預期結果包括______(填選項前的符號)。

a.NGA1基因敲除突變體 b.NCED3基因敲除突變體 c.導入含NGA1突變基因的表達載體 d.導入含NGA1基因的表達載體 e.導入空載體 f.正常供水環(huán)境 g.模擬干旱環(huán)境 h.NCED3-mRNA含量高于對照組 i.NCED3-mRNA含量低于對照組

【答案】調節(jié) 催化 增加 關閉 不能,NCED4基因主要在根中表達,檢測的是葉片mRNA含量(或NCED基因表達具有組織特異性) 地上部分生長緩慢可減少蒸騰作用,并將有機物更多地分配給地下部分;地下部分生長快利于水分的吸收 干旱是促進(啟動)NCED3基因表達的信號(正常灌溉下NCED3基因幾乎不表達) 反向連接載體的導入干擾了NCED3基因的表達(翻譯),NCED3的合成減少 NGA1基因敲除突變體和野生型植株 adgh

【解析】

1、植物激素是由植物體內產生,并從產生部位運輸?shù)阶饔貌课,對植物的生長發(fā)育具有顯著影響的微量有機物,ABA主要在植物體的根冠、萎蔫的葉片中合成。脫落酸(ABA)是一種抑制生長的植物激素,因能促使葉子脫落而得名。除促使葉子脫落外尚有其他作用,如使芽進入休眠狀態(tài)、促使馬鈴薯形成塊莖、抑制細胞生長、引起氣孔關閉以及調節(jié)種子胚的發(fā)育等生理作用。

2、分析圖1中甲圖可知,干旱脅迫下,葉片ABA含量增加,引起氣孔關閉,降低蒸騰作用,減少水分的散失;圖1中乙圖和丙圖都是對葉片中相關基因的mRNA含量進行的測定,根據(jù)題意NCED4基因在根細胞中表達,因此根據(jù)圖1無法確認NCED4基因與干旱脅迫的關系。

分析表中數(shù)據(jù)可知:在干旱缺水條件下,野生型植株中脫落酸抑制莖葉的生長,同時促進根的生長,說明脫落酸的這種作用,有利于植物適應缺水環(huán)境。

分析圖2可知,在正常灌溉的條件下,1、2、3組中ABA含量無明顯的差異性,可能是在正常灌溉條件下NCED3基因不表達;干旱脅迫下,456組中ABA含量均有增加,特別是轉基因水稻幼苗ⅠABA增加最多,轉基因水稻幼苗Ⅱ增加最少。

1ABA作為植物激素對植物生命活動起到調節(jié)作用,ABA在合成過程中需要多種酶的催化作用。

2)①由圖1中甲圖可知,干旱脅迫下,葉片ABA含量增加,誘導植物氣孔關閉,降低蒸騰作用,減少水分散失。

②根據(jù)題意,NCED1―NCED5基因的表達具有組織特異性,NCED4基因主要在根中表達,而圖1的結果,檢測的是葉片mRNA含量,因此不能確認NCED4基因不是干旱脅迫的響應基因。

(3)①據(jù)表中結果,可以看出施加ABA后,根生長加快,從土壤吸收水分增多;莖葉生長減慢,植物葉片的蒸騰速率會減慢,水分散失減少,并將有機物更多地分配給地下部分以對環(huán)境的變化作出反應。

②識圖分析可知,圖21、23ABA含量無明顯差異,而45、6ABA含量都有所增加,1、23組水稻細胞內均有NCED3,分析其原因可能是正常灌溉下NCED3基因幾乎不表達,因此三組的ABA幾乎無明顯差異性。

③分析圖2可知,干旱脅迫下,4、5、6組中ABA含量均有增加,特別是第5組轉基因水稻幼苗ⅠABA增加最多,第6組轉基因水稻幼苗Ⅱ增加最少,且低于第4組ABA含量,第6組植株是反向連接構建表達載體(轉錄NCED3基因的非模板鏈),獲得轉基因水稻幼苗Ⅱ,可能反向連接載體的導入干擾了NCED3基因的表達(翻譯),使得NCED3的合成減少所致。

(4)根據(jù)題意,該實驗的目的是推測NGA1蛋白是干旱環(huán)境促進NCED3基因表達的調控因子。該實驗的自變量是NGA1基因的有無,因此通過檢測野生型植株(對照組)和NGA1基因敲除突變體植株(實驗組)的NCED3基因表達量,如果結果為實驗組低于對照組,則初步支持上述推測;若要進一步驗證推測,應繼續(xù)選擇NGA1基因敲除突變體植株為實驗材料,為其導入含NGA1基因的表達載體,使其細胞內含有了NGA1基因,然后將該植株放在模擬的干旱條件下實驗,若推測成立,則NGA1基因表達的NGA1蛋白促進NCED3基因的表達,那么檢測實驗組和對照組細胞內NCED3-mRNA含量,則 NCED3-mRNA含量高于對照組。

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