Question

【題目】玉米是世界上的第三大糧食作物，廣泛種植于世界各地。研究表明，轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米中的細菌BT基因能表達一種毒蛋白，這種毒蛋白能有效殺死玉米螟（一種農(nóng)業(yè)害蟲）。請回答下列問題：

（1）BT基因在基因工程中稱為_________。在基因表達載體中，除了要有BT基因外，還必須有啟動子、終止子和______，將BT基因?qū)�入玉米細胞常�?/span>_________法。

（2）利用PCR技術(shù)擴增BT基因時，需要提供模板、原料、______、引物等條件，將模板DNA加熱至9095℃ 的目的是__________。

（3）BT基因與載體結(jié)合過程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。若某限制酶的識別序列和切點是，請畫出目的基因被限制酶切割后所形成的黏性末端_______。DNA連接酶對所連接的兩端堿基序列__________(填“有”或“沒有”）專一性要求，定性地檢測BT基因的“表達”產(chǎn)物可采用_____的方法。

（4）為了防止抗蟲玉米通過花粉傳播帶來的生態(tài)學(xué)問題，科研小組考慮將抗蟲基因?qū)�入到玉米根尖細胞�?/span>__________中以防止基因污染，同時在大規(guī)模種植的抗蟲玉米田中設(shè)置一個或多個避難所種植普通玉米，目的是_______________。

Answer 1

【答案】 目的基因 標記基因 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 耐高溫的DNA聚合酶 使BT基因受熱后解旋為單鏈 沒有 抗原－抗體雜交 線粒體 延緩抗毒蛋白的玉米螟出現(xiàn)/或減緩害蟲抗性基因頻率增加的速度

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）基因表達載體的組成包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因，轉(zhuǎn)基因抗蟲玉米培育過程中的目的基因是BT基因；將目的基因（BT基因）導(dǎo)入植物細胞（玉米）常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。

（2）利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，需要的條件有模板、原料、耐高溫的DNA聚合酶、一對引物等，將模板DNA加熱至9095℃ 的目的是使BT基因受熱后解旋為單鏈。

（3）根據(jù)題意分析，某限制酶的識別序列和切點是，根據(jù)堿基互補配對原則可知，該酶切割后產(chǎn)生的粘性末端為；DNA連接酶對所連接的兩端堿基序列沒有專一性要求。BT基因的“表達”產(chǎn)物是一種毒蛋白，可以采用抗原－抗體雜交的方法進行檢測。

（4）將抗蟲基因?qū)�入到玉米根尖細胞的線粒體中可以防止抗蟲玉米通過花粉傳播帶來的基因污染；同時在大規(guī)模種植的抗蟲玉米田中設(shè)置一個或多個避難所種植普通玉米，目的是延緩抗毒蛋白的玉米螟出現(xiàn)/或減緩害蟲抗性基因頻率增加的速度。