Question

【題目】（20分）玉米自交系（遺傳穩(wěn)定的育種材料）B具有高產(chǎn)、抗病等優(yōu)良性質(zhì)，但難以直接培育成轉(zhuǎn)基因植株，為使其獲得抗除草劑性狀，需依次進(jìn)行步驟I、II試驗(yàn)。
Ⅰ．獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米自交系A(chǔ)，技術(shù)路線如下圖。

（1）為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用2種限制酶，選擇的原則是______（單選）。
①Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個切割位點(diǎn)
②G基因編碼蛋白質(zhì)的序列中，每種限制酶只有一個切割位點(diǎn)
③酶切后，G基因形成的兩個黏性末端序列不相同
④酶切后，Ti質(zhì)粒形成的兩個黏性末端序列相同
A.①③
B.①④
C.②③
D.②④
（2）下表是4種玉米自交系幼胚組織培養(yǎng)不同階段的結(jié)果。據(jù)表可知，細(xì)胞脫分化時使用的激素是 ， 自交系的幼胚最適合培養(yǎng)成愈傷組織作為轉(zhuǎn)化受體。

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織時，T-DNA攜帶插入其內(nèi)的片段轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞。篩選轉(zhuǎn)化的愈傷組織，需使用含的選擇培養(yǎng)基。
（4）轉(zhuǎn)化過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，導(dǎo)致未轉(zhuǎn)化愈傷組織也可能在選擇培養(yǎng)基上生長。含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達(dá)，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色。用K分別處理以下愈傷組織，出現(xiàn)藍(lán)色的是_______________（多選）。
A.無農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織
B.無農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織
C.農(nóng)桿菌附著的未轉(zhuǎn)化愈傷組織
D.農(nóng)桿菌附著的轉(zhuǎn)化愈傷組織
（5）組織培養(yǎng)獲得的轉(zhuǎn)基因植株（核DNA中僅插入一個G基因）進(jìn)行自交，在子代含G基因的植株中，純合子占。繼續(xù)篩選，最終選育出抗除草劑純合自交系A(chǔ)。
（6）II．通過回交使自交系B獲得抗除草劑性狀
抗除草劑自交系A(chǔ)（GG）與自交系B雜交產(chǎn)生F1 ， 然后進(jìn)行多輪回交（下圖）。自交系B作為親本多次回交的目的是使后代。

（7）假設(shè)子代生活力一致，請計算上圖育種過程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例，并在圖1中畫出對應(yīng)的折線圖。若回交后每代不進(jìn)行鑒定篩選，直接回交，請?jiān)趫D2中畫出相應(yīng)的折線圖。

（8）下表是鑒定含G基因植株的4種方法。請預(yù)測同一后代群體中，4種方法檢出的含G基因植株的比例，從小到大依次是。

方法 檢測對象 檢測目標(biāo) 檢出的含G基因植株的比例

PCR擴(kuò)增 基因組DNA G基因 x1 分子雜交 總mRNA G基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 x2 抗原-抗體雜交 總蛋白質(zhì) G基因編碼的蛋白質(zhì) x3 噴灑除草劑 幼苗 抗除草劑幼苗 x4

對Hn繼續(xù)篩選，最終選育出高產(chǎn)、抗病、抗除草劑等優(yōu)良性狀的玉米自交系

Answer 1

【答案】
（1）A
（2）2,4—D；乙
（3）除草劑
（4）B,D
（5）1/3
（6）積累越來越多自交系B的遺傳物質(zhì)/優(yōu)良性狀
（7）

|

（8）X4 ， X3 ， X2 ， X1
【解析】