Question

【題目】漆酶是真菌、細(xì)菌中的氧化酶，可用于有毒化合物的生物消除。為提高產(chǎn)漆酶菌株（C1）的產(chǎn)酶量，對(duì)其培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化研究。

Ⅰ.培養(yǎng)基成分的優(yōu)化研究：為確定最佳的營(yíng)養(yǎng)成分組合，科研人員配制了9組以A、B為主要營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，并添加0.04%的愈創(chuàng)木酚（被氧化后形成紅褐色）。接種C1培養(yǎng)后，結(jié)果如下表所示。

實(shí)驗(yàn)組	營(yíng)養(yǎng)成分		培養(yǎng)結(jié)果（mm）
	A（20g/L）	B(2.84g/L)	顯色圈直徑
1	葡萄糖	蛋白胨	37
2	葡萄糖	(NH4)2SO4	49
3	葡萄糖	KNO3	23
4	蔗糖	蛋白胨	25
5	蔗糖	(NH4)2SO4	52
6	？	？	32
7	麥芽糖	蛋白胨	58
8	麥芽糖	(NH4)2SO4	56
9	麥芽糖	KNO3	55

（1）實(shí)驗(yàn)組6中的成分A、B分別是________。

（2）據(jù)培養(yǎng)結(jié)果分析，營(yíng)養(yǎng)成分的最佳組合是實(shí)驗(yàn)組_______，闡述理由_________。

Ⅱ.培養(yǎng)基pH值的優(yōu)化研究：選取最佳營(yíng)養(yǎng)成分組合，配制成pH值為3.0、5.0、7.0的三種液體培養(yǎng)基，接種等量C1菌體并培養(yǎng)一段時(shí)間，定期取樣測(cè)定培養(yǎng)基中漆酶量（以酶活力表示），結(jié)果如下圖所示。

（1）調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值應(yīng)在_____________（填編號(hào)）進(jìn)行。

①滅菌前②滅菌后倒平板前③倒平板后接種前④接種后

（2）據(jù)上圖分析，為獲得最多的漆酶，C1的最佳培養(yǎng)方案是_________。

Ⅲ.經(jīng)一系列培養(yǎng)環(huán)境的優(yōu)化，C1產(chǎn)漆酶量有所提高。在此基礎(chǔ)上，要獲得產(chǎn)酶更高的菌株，可采取的育種方法是__________。

（1）下圖表示培養(yǎng)和分離某種細(xì)菌的部分操作步驟，下列敘述正確的是（______）。

A．步驟①倒平板操作時(shí)，倒好后應(yīng)將其倒過來放置

B．步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后迅速蘸取菌液后劃線

C．步驟③三個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落

D．步驟④恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對(duì)大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)

（2）借助光學(xué)顯微鏡來觀察微生物細(xì)胞的結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)了一種新的單細(xì)胞生物，并欲對(duì)其進(jìn)行分類，下列選項(xiàng)不能作為分類依據(jù)的是（_________）。

A．核膜的有無B．核糖體的有無 C．細(xì)胞壁的有無D．膜上磷脂的有無

Answer 1

【答案】 蔗糖、KNO3 7 顯色圈直徑最大，說明被漆酶氧化的愈創(chuàng)木酚最多，酶活力最高 ① 將C1接種于pH5.0培養(yǎng)基中，并于第6天提取 誘導(dǎo)菌株突變?cè)龠M(jìn)行篩選 A、C B、D

【解析】試題分析：本題考查微生物的分離和培養(yǎng)以及培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇利用，通過對(duì)對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果的分析和處理，再結(jié)合題意作答。

Ⅰ.（1）根據(jù)表格可知，9組實(shí)驗(yàn)組分成三組探究營(yíng)養(yǎng)成分A對(duì)產(chǎn)漆酶菌株的影響，每一組中有探究營(yíng)養(yǎng)成分B對(duì)產(chǎn)漆酶菌株的影響，A的成分包括葡萄糖、蔗糖和麥芽糖，B的成分包括蛋白胨、(NH4)2SO4和KNO3，因此實(shí)驗(yàn)組6中的成分A、B分別是蔗糖、KNO3。

（2）據(jù)培養(yǎng)結(jié)果分析可知，顯色圈直徑最長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)成分的最佳組合是實(shí)驗(yàn)組7，在實(shí)驗(yàn)組中產(chǎn)漆酶菌株顯色圈直徑最大，說明被漆酶氧化的愈創(chuàng)木酚最多，酶活力最高。

Ⅱ.（1）調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值應(yīng)在①滅菌前進(jìn)行，這樣不會(huì)導(dǎo)致在進(jìn)行此過程時(shí)導(dǎo)致雜菌感染。

（2）據(jù)上圖分析，為獲得最多的漆酶，C1的最佳培養(yǎng)方案是將C1接種于pH5.0培養(yǎng)基中，并于第6天提取，該培養(yǎng)方案的酶活力最大。

Ⅲ. 要獲得產(chǎn)酶更高的菌株，可以采用誘變育種方法，即誘導(dǎo)菌株突變?cè)龠M(jìn)行篩選。

（1）倒完平板后蓋上培養(yǎng)皿，冷卻后將平板倒過來放置，A正確；步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后，待冷卻后才可以沾取菌液后平板劃線，B錯(cuò)誤；步驟③多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落，C正確；步驟④培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對(duì)大腸桿菌進(jìn)行分離得到純種，平板劃線法不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。

（2）可以根據(jù)核膜的有無，確定該細(xì)胞為真核細(xì)胞還是原核細(xì)胞，A錯(cuò)誤；原核細(xì)胞和真核細(xì)胞均有核糖體，因此不能根據(jù)核糖體的有無對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行分類，B正確；因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁，而其他絕大多數(shù)生物都具有細(xì)胞壁，所以根據(jù)細(xì)胞壁的有無可以判斷該生物是否是動(dòng)物，C錯(cuò)誤；所有的生物膜上均含有磷脂，因此不能根據(jù)膜上磷脂的有無對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分類，D正確。