Question

【題目】利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因生物生產(chǎn)可食用疫苗，將會克服常規(guī)疫苗使用時(shí)所面臨的諸多問題．下圖是部分過程示意圖，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性內(nèi)切酶

（1）質(zhì)粒DNA分子中的兩條鏈靠_____鍵維系成雙鏈結(jié)構(gòu)。

（2）以下說法錯誤的有_____

A．構(gòu)建含抗原基因的表達(dá)載體時(shí)應(yīng)選用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ

B．抗卡那霉素基因的存在將有利于篩選含有抗原基因的細(xì)胞

C．抗原基因能和質(zhì)粒重組是它們都是有四種脫氧核糖核苷酸構(gòu)成的雙螺旋結(jié)構(gòu)

D．DNA連接酶不具有專一性體現(xiàn)在可連接任何兩個脫氧核苷酸之間的化學(xué)鍵

（3）用Pst I、Sma I、EcoR I兩兩聯(lián)合酶切含目的基因的DNA和質(zhì)粒的結(jié)果見表．據(jù)表所列酶切結(jié)果判斷目的基因的大小為_____kb，若用Pst I、Sma I、EcoR I三酶聯(lián)合酶切表達(dá)載體，下列可獲得的片段長度有_____．

酶切結(jié)果（1kb＝1000堿基對）

	Pst I+Sma I	Sma I+EcoR I	Pst I+EcoR I
含抗原基因 的DNA	1.2kb 0.9kb 0.1kb	1.3kb 0.6kb 0.3kb	1.2kb 0.6kb 0.4kb
質(zhì)粒	2.9kb 0.8kb	3.0kb 0.7kb	2.2kb 1.5kb

A．2.9kb　　　B．0.3kb　　　C．2.5kb　　　D．0.7kb　　　E．2.3kb　　　F．0.4kb

（4）動物基因工程通常以受精卵作為受體細(xì)胞的根本原因是_____．

A．受精卵能使目的基因高效表達(dá)B．受精卵尺寸較大，便于DNA導(dǎo)入操作

C．受精卵基因組更易接受DNA的插入D．受精卵可發(fā)育成動物個體

（5）乳腺生物反應(yīng)器可以從轉(zhuǎn)基因動物分泌的乳汁中獲得人源性蛋白質(zhì)藥物，但受轉(zhuǎn)基因動物的性別和生長發(fā)育時(shí)期的限制影響效益．研究者發(fā)現(xiàn)如果將藥物蛋白基因移到動物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中表達(dá)，利用轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液生產(chǎn)提取藥物比乳汁中提取藥物具有更大的優(yōu)越性．你認(rèn)為這優(yōu)越性的體現(xiàn)是_____。

Answer 1

【答案】氫鍵 D 0.4 BCEF D 處于不同發(fā)育時(shí)期的雌雄動物都可生產(chǎn)藥物

【解析】

分析題圖，圖示表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，是基因工程的核心步驟，圖示中含抗原基因的DNA分子中含有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列，其中SmaⅠ的識別序列位于目的基因上；質(zhì)粒中含有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ四種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列。

（1）質(zhì)粒DNA分子中的兩條鏈靠氫鍵鍵維系成雙鏈結(jié)構(gòu)。

（2）A、含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點(diǎn)，但限制酶SmaⅠ的切割位點(diǎn)位于抗病基因上，對SmaⅠ位點(diǎn)進(jìn)行切割破壞了抗病基因的結(jié)構(gòu)，所以要獲得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ對圖中對應(yīng)的位點(diǎn)進(jìn)行切割。因此，要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒，應(yīng)選用PstⅠ、EcoRⅠ限制酶切割質(zhì)粒，A正確；

B、抗卡那霉素基因作為標(biāo)記基因，主要作用是篩選含有目的基因（抗原基因）的受體細(xì)胞，B正確；

C、抗原基因能和質(zhì)粒重組是因?yàn)樗鼈兌际怯兴姆N脫氧核糖核苷酸構(gòu)成的雙螺旋結(jié)構(gòu)，C正確；

D、酶都具有專一性，DNA連接酶的專一性體現(xiàn)在只能連接兩個DNA片段之間的磷酸二酯鍵，D錯誤。

故選D。

（3）分析圖解結(jié)合表格可知，切割含抗原基因的DNA時(shí)，用Pst I+Sma I或Pst I+EcoR I中利用了同種Pst I，因此比較片段可知，Pst I酶左側(cè)片段為1.2kb；用Sma I+EcoR I或Pst I+EcoR I中都利用了EcoR I，因此EcoR I酶切位點(diǎn)的右側(cè)片段為0.6kb，因此根據(jù)酶切片段結(jié)果可知，目的基因的大小為0.4kb；結(jié)合表格中質(zhì)粒的切割片段可知，質(zhì)粒左側(cè)PstⅠ與EcoRⅠ段的片段為2.2，而目的基因可以被Sma I切割成0.1kb和0.3kb兩種片段，因此若用Pst I、Sma I、EcoR I三酶聯(lián)合酶切表達(dá)載體，可獲得的片段長度有0.3kb、2.5kb、2.3kb、0.4kb、0.1 kb、2.2 kb，故選BCEF。

（4）動物基因工程通常以受精卵作為受體細(xì)胞的根本原因是動物體細(xì)胞的全能性受到限制，不能表現(xiàn)出來，而受精卵的全能性最高，可以發(fā)育成完整的動物個體，故選D。

（5）從轉(zhuǎn)基因牛羊尿液中提取藥物不受時(shí)間和性別的限制，而從動物乳汁中提取藥物則受到限制。