Question

【題目】[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]下圖是利用基因工程辦法生產(chǎn)人白細(xì)胞干擾素的基本過程圖，據(jù)圖回答：

（1）一般將受體大腸桿菌用__________________處理，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細(xì)胞稱為__________________。

（2）②物質(zhì)是從大腸桿菌分離出__________________。其化學(xué)本質(zhì)是__________________，它必須能在宿主細(xì)胞中_________________。

（3）檢測(cè)干擾素基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是__________________。

（4）若將干擾素基因重組后導(dǎo)入牛的受精卵，獲得能產(chǎn)生干擾素的轉(zhuǎn)基因牛，也可大大提高干擾素的產(chǎn)量，請(qǐng)回答以下問題：

①利用______________酶將干擾素基因與牛乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子（即RNA聚合酶結(jié)合的部位）等調(diào)控組件連接在一起。

②基因工程操作過程的實(shí)現(xiàn)至少需要三種必要的工具，其中與“限制性核酸內(nèi)切酶”作用部位完全相同的酶是___________。

Answer 1

【答案】 CaCl2 感受態(tài)細(xì)胞 質(zhì)粒 DNA 復(fù)制并穩(wěn)定地保存 采用DNA-RNA分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄形成mRNA DNA連接酶 DNA連接酶

【解析】試題分析：基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲��；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞 ④目的基因的檢測(cè)與鑒定�；�因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．需要限制酶來切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體。將目的基因?qū)�入原核�?xì)胞，常用CaCl2處理以增加細(xì)胞壁的通透性，變成感受態(tài)細(xì)胞，能吸收周圍的DNA分子。

（1）大腸桿菌作為受體細(xì)胞，常用Ca2+處理法，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，在一定溫度條件下完成轉(zhuǎn)化。
（2）②物質(zhì)是從大腸桿菌分離出的質(zhì)粒，其化學(xué)本質(zhì)是小型環(huán)狀DNA分子，它必須能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存。
（3）檢測(cè)干擾素基因是否發(fā)揮功能作用的第一步是采用DNA-RNA分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄形成mRNA，

（4）①要將目的基因和運(yùn)載體連接需要DNA連接酶的催化。

②基因工程中常用到的必須的工具是限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體，限制性核酸內(nèi)切酶作用的是切開DNA的磷酸二酯鍵，DNA連接酶是將此處的磷酸二酯鍵連接起來。